[发明专利]一种防龋釉基质蛋白功能多肽及其制备方法和用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种防龋技术，特别涉及一种防龋釉基质蛋白功能多肽及其制备方法和用途。 

背景技术

龋病是人类最常见的口腔疾病。由于龋病发病率高，流行区广，严重影响口腔及全身健康，世界卫生组织已将其列为人类重点防治的三大非传染性疾病之一，仅次于心血管疾病和肿瘤。 

氟化物作为一种经典的防龋制剂，在过去的四十多年里，以各种不同的形式被利用，如饮水加氟、含氟牛奶或含氟食盐、局部涂氟(含氟牙膏、含氟凝胶、含氟漱口水)等，从而能不同程度地降低人群中的患龋率，被公认为当前世界上最有效的防龋措施。然而随着多种氟化物制剂使用的推广，使用浓度及频率的增加，耐氟菌株、氟斑牙、氟骨症的出现使氟化物防龋局限性日益突显。 

抗微生物制剂如洗必泰、四环素等，可直接作用于细菌而预防龋病，但长期使用易引起口腔菌群失调，使细菌产生耐药性，具有明显的毒副作用。 

免疫防龋具有一定效果，但存在增强免疫原性及人体应用安全性问题，此外影响口腔菌群生态的问题也函待解决。 

中药如儿茶、大黄、黄芩、蜂房、槟榔、三七、茶多酚等已被证实具有干扰细菌代谢、抑制牙菌斑生物膜形成等作用，但存在药液牙体染色、耐药性等问题。 

不定形磷酸钙、糖的替代品木糖醇及山梨醇、中药五倍子及隔消山、纳米羟磷灰石、酪蛋白磷酸肽、微量元素、橄榄油、树脂等的再矿化作用被先后报道，但由于效果不明显或实验结果不一，目前结论尚未统一。 

针对上述问题，本领域积极探寻其他的防龋药物和方法。 

釉基质蛋白（EMP）是一组来自上皮根鞘的蛋白质，是在牙齿发育期Hertwig上皮根鞘内层的成釉细胞分泌的一种调控牙矿化的基质蛋白，在牙本质刚刚开始矿化之前表达，在牙本质早期成熟阶段停止表达。釉基质蛋白含有釉原蛋白、成釉蛋白、釉蛋白等蛋白质成分，其中釉原蛋白占发育期牙釉质蛋白质提取物的90%以上。釉原蛋白在釉基质生物矿化过程中起着决定性作用。成釉细胞分泌釉原蛋白后，在牙本质的诱导下，釉质很快进行生物矿化。釉原蛋白对釉质矿化的起始、晶核的形成及排列等诸多因素起着重要作用。釉原蛋白可为釉质生物矿化提供必要的支架，并且还可控制晶体生长的速度，维持晶体生长，是釉质生物矿化的关键。 

近年，基于釉基质蛋白的生物矿化功能，体外利用釉基质蛋白合成人工羟磷灰石已获得 成功。Chen等模拟牙釉质矿化过程,利用釉基质蛋白控制合成了在化学组成上和晶体尺寸上都和自然牙釉质非常相似的纳米棒状羟磷灰石。Yamagish等在牙釉质表面形成了具有釉质结构的氟磷灰石，这些氟磷灰石排列致密，平行排列，垂直于釉质表面。国内学者王志伟等将牙釉质放置在含SD大鼠牙釉基质蛋白的磷酸盐琼脂-醋酸钙溶液体系中7天，结果发现添加釉基质蛋白的牙釉质表面出现晶体带状结构。这些实验结果均提示釉基质蛋白具有诱导牙釉质再矿化的强大潜力，利用釉基质蛋白的这种潜力从而促进早期龋再矿化，极可能为龋病防治提供一条崭新的思路。 

但是，目前釉基质蛋白尚未直接用于防龋。目前釉基质蛋白主要通过以下途径获得：①从牙胚中提取釉基质蛋白。②根据釉原蛋白、非成釉蛋白的基因序列，利用生物工程技术实现了釉原蛋白的人工基因重组，如重组大鼠的釉原蛋白Mr179、Mrl66。③商品化的釉基质衍生物。1999年瑞典Biora开发了(釉原蛋白的商品名)产品，经美国FDA批准用作牙周骨内缺损与根面平整区域的治疗，随后在牙周病治疗和牙周缺损修复中得到极为广泛应用。上述釉基质蛋白来源中，提取法需要组织材料较多，得到的是不同分子量的混合成分，很难得到高纯度产物；基因重组蛋白程序复杂，且翻译后加工修饰体系不完善，复性和修饰很困难，蛋白功能常不完善；瑞典为猪牙胚提取的釉基质蛋白纯化，取典型釉原蛋白的3个相对分子量峰值冻干保存获得，虽然具有明显促牙周组织再生作用，但可能丢失有效的防龋功能片段。综上述，目前釉基质蛋白的获得方法复杂且可能丢失有效的防龋片段，如何利用釉基质蛋白进行有效防龋成为本领域一直想解决但未能解决的难题。 

发明内容

本发明的发明目的之一在于：针对上述存在的问题，创新性提出利用仿生矿化防龋的思想，构建一种可有效防龋的多肽。 

本发明采用的技术方案是这样的：一种防龋釉基质蛋白功能多肽，包含如SEQIDNO.1所示的氨基酸序列，以及包含SEQIDNO.1所示的氨基酸序列的盐或酯； 

SEQIDNO.1：QPYQPVQPHQPMQPQ