[发明专利]用于制备棉花胚性愈伤组织的培养基、试剂盒及其用途

权利要求书

1.一组用于制备棉花胚性愈伤组织的培养基，其特征在于，包含：

愈伤组织诱导培养基，所述愈伤组织诱导培养基为添加了0.1mg/L KT、0.05mg/L2,4-D和1.5g/L gelrite的MSB培养基；

胚性愈伤组织诱导培养基，所述胚性愈伤组织诱导培养基为添加了1.9g/L KNO₃和2.0g/L gelrite的MSB培养基；以及

胚性愈伤组织增殖培养基，所述胚性愈伤组织增殖培养基为添加了1.9g/L KNO₃、0.1g/L天冬酰胺、0.1g/L谷氨酰胺和1.8g/L gelrite的MSB培养基，

任选地，所述棉花为陆地棉。

2.一种用于制备棉花胚性愈伤组织的试剂盒，其特征在于，包含权利要求1所述的一组培养基，

任选地，所述棉花为陆地棉。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述愈伤组织诱导培养基、所述胚性愈伤组织诱导培养基和所述胚性愈伤组织增殖培养基分别设置在不同的容器中。

4.权利要求1所述的培养基，或者权利要求2或3所述的试剂盒在制备棉花胚性愈伤组织中的用途，

任选地，所述棉花为陆地棉。

5.一种制备棉花胚性愈伤组织的方法，其特征在于，包括以下步骤：

利用愈伤组织诱导培养基对棉花无菌苗的下胚轴进行培养，以便获得愈伤组织；

利用胚性愈伤组织诱导培养基对所述愈伤组织进行培养，以便获得初性胚性愈伤组织；以及

利用胚性愈伤组织增殖培养基对所述初性胚性愈伤组织进行培养，以便使所述初性胚性愈伤组织增殖，获得胚性愈伤组织，

其中，

所述愈伤组织诱导培养基为添加了0.1mg/L KT、0.05mg/L2,4-D和1.5g/L gelrite的MSB培养基，

所述胚性愈伤组织诱导培养基为添加了1.9g/L KNO₃和2.0g/L gelrite的MSB培养基，

所述胚性愈伤组织增殖培养基为添加了1.9g/L KN0₃、0.1g/L天冬酰胺、0.1g/L谷氨酰胺和1.8g/L gelrite的MSB培养基，

任选地，所述棉花为陆地棉。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，

对所述棉花无菌苗的下胚轴进行培养时，每隔25～30天继代一次；

对所述愈伤组织进行培养时，每隔25～30天继代一次；

对所述初性胚性愈伤组织进行培养时，每隔30天继代一次。

7.一种制备棉花再生植株的方法，其特征在于，包括以下步骤：

根据权利要求5或6所述的制备棉花胚性愈伤组织的方法，制备棉花胚性愈伤组织；

利用分化培养基对所述棉花胚性愈伤组织进行培养，以便使所述棉花胚性愈伤组织分化形成子叶胚；

利用成苗培养基对所述子叶胚进行培养，以便获得再生苗；以及

将所述再生苗嫁接于棉花实生苗上，以便获得所述棉花再生植株，

其中，

所述分化培养基为去除NH₄NO₃并添加了1.9g/L KNO₃、0.1g/L天门冬酰胺、0.1g/L谷氨酰胺和2.0g/L gelrite的MSB培养基，

所述成苗培养基为添加了2.0g/L gelrite的MSB培养基，

任选地，所述棉花为陆地棉。

8.一种制备转基因棉花植株的方法，其特征在于，包括以下步骤：

根据权利要求5或6所述的制备棉花胚性愈伤组织的方法，制备棉花胚性愈伤组织；以及

利用农杆菌介导法，对所述棉花胚性愈伤组织进行基因转化，以便获得转基因棉花植株，

任选地，所述棉花为陆地棉。