[发明专利]分离的寡核苷酸rno-miR-9及其在脑损伤中的应用有效
申请号: | 201310351401.7 | 申请日: | 2013-08-13 |
公开(公告)号: | CN103409425A | 公开(公告)日: | 2013-11-27 |
发明(设计)人: | 彭瑞云;赵黎;熊璐;董霁;高亚兵;孙成峰;左红艳;张静;姚斌伟 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12Q1/68;C12M1/34 |
代理公司: | 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 | 代理人: | 李志东 |
地址: | 100850*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 分离 寡核苷酸 rno mir 及其 脑损伤 中的 应用 | ||
技术领域
本发明涉及分子生物学领域,具体地,本发明涉及分离的寡核苷酸、用于确定生物样本存在脑损伤的试剂盒和用于确定生物样本存在脑损伤的系统。
背景技术
微波污染是当今社会十分关注的问题。已有研究证实,脑是微波辐射的敏感靶器官。研究表明,30mW/cm2微波辐射对大鼠空间学习和记忆能力有损伤作用;可导致脑组织中氨基酸类神经递质含量降低和代谢紊乱;引起脑组织和超微结构破坏。但目前微波辐射致脑损伤的生物标志物研究较少,特别是miRNA的标志物研究尚属空白。因此,迫切需要开发出一种特异、敏感的微波辐射致脑损伤相关的miRNA生物标志物。
发明内容
本发明旨在至少在一定程度上解决上述技术问题之一。为此,本发明的一个目的在于提出一种能够确定生物样本存在脑损伤的miRNA生物标志物,该miRNA生物标志物具有高特异性和高敏感性的特点。
在本发明的第一方面,本发明提供了一种分离的寡核苷酸。根据本发明的实施例,所述寡核苷酸具有如SEQ ID NO:1所示的序列。根据本发明的实施例,发明人确定了生物样本存在脑损伤的miRNA生物标志物,该miRNA生物标志物具有如SEQ ID NO:1所示的序列,并且确定了该miRNA生物标志物与突触囊泡胞吐、神经递质传递、学习记忆、血脑屏障、神经系统发育和细胞凋亡等脑损伤相关过程密切相关。
其中,上述寡核苷酸的序列如SEQ ID NO:1所示:UCUUUGGUUAUCUAGCUGUAUGA。
在本发明的第二方面,本发明提供了一种用于确定生物样本存在脑损伤的试剂盒。根据本发明的实施例,所述试剂盒包含探针,所述探针特异性识别具有如SEQ ID NO:1所示序列的所述的寡核苷酸。利用根据本发明的实施例的试剂盒,能够有效地确定生物样品是否存在脑损伤。
在本发明的第三方面,本发明提供了一种用于确定生物样本存在脑损伤的系统。根据本发明的实施例,所述用于确定生物样本存在脑损伤的系统包括取样设备,用于从生物体收集生物样本;核酸提取设备,所述核酸提取设备与所述取样设备相连,用于从所述生物样本获取核酸样品;检测设备,所述检测设备与所述核酸提取设备相连,用于确定所述核酸样品中具有如SEQ ID NO:1所示的序列的核酸分子的含量;和分析设备,所述分析设备与所述检测设备相连,用于基于具有如SEQ ID NO:1所示的序列的核酸分子的含量确定所述生物体是否存在脑损伤。利用该系统,能够有效地确定生物样品是否存在脑损伤,从而可以有效地筛选存在脑损伤的生物样品。
另外,根据本发明的实施例的分离的寡核苷酸,还可以具有如下附加的技术特征,所述寡核苷酸为RNA。由此,可以直接将生物样本中提取分离出完整无降解的RNA,经过荧光标记,利用生物芯片杂交技术进行芯片扫描和分析,从而确定生物体是否存在脑损伤。
根据本发明实施例的确定生物样本存在脑损伤的试剂盒,还可以具有如下附加的技术特征,所述探针是以芯片的形式提供的。由此,将上述从生物样品中分离的寡核苷酸与具有最新更新生物序列信息的芯片进行杂交,进行全面筛选从而可以确定生物样本存在脑损伤的生物标记物。
根据本发明实施例的确定生物样本存在脑损伤的系统,还可以具有如下附加的技术特征:
根据本发明的实施例,所述检测设备为核酸杂交芯片。由此,将上述从生物样品中分离的寡核苷酸与具有最新更新生物序列信息的芯片进行杂交并进行扫描和分析,进行全面筛选从而可以确定生物样本存在脑损伤的生物标记物。
根据本发明的实施例,所述核酸样品为所述生物样本的总RNA。由此,可以直接将生物样本中提取分离出完整无降解的RNA,经过荧光标记,利用生物芯片杂交技术进行芯片扫描和分析,从而确定生物体是否存在脑损伤。
根据本发明的实施例,所述分析设备适于将所述核酸样品中具有如SEQ ID NO:1所示的序列的核酸分子的含量与预定参数进行比较,并且基于核酸样品中具有如SEQ ID NO:1所示的序列的核酸分子的含量与所述预定参数的差异确定所述生物体是否存在脑损伤。由此,可以将待测生物样本中的具有如SEQ ID NO:1所示的序列的核酸分子的含量与已知生理状态正常的生物样本的预定参数进行比较,从而确定两组样本中的具有如SEQ ID NO:1所示的序列的核酸分子的含量的差异,从而确定待测生物样本中是否存在脑损伤。
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