[发明专利]一株Ming氏人膨胀型胃癌细胞系及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及微生物动物细胞系，尤其是涉及一株Ming氏人膨胀型胃癌细胞系及其应用。

背景技术

胃癌是最常见的恶性肿瘤之一，在全世界范围内，胃癌的发病率居所有恶性肿瘤第四位，死亡率居第二位。在中国，胃癌是最常见的消化道肿瘤，占恶性肿瘤死亡率的第一位，全国平均年死亡率为16/10万人口，高发地达60/l0万人口。虽然胃癌的诊断及治疗已经取得了长足的进步，但近10年来其5年生存率并没有明显的提高，术后复发和转移是其死亡的重要原因，居高不下的发病率和死亡率已经使胃癌的研究与治疗成为亟待解决的重大课题。目前的资料表明，胃癌的发生、发展是一个多因素、多阶段的发展过程，其恶变过程包括了细胞增生、DNA复制过度、细胞周期功能紊乱、细胞永生化、逃逸凋亡、血管新生（Angiogenesis）及浸润转移等一系列的过程，地域环境及生活饮食、幽门螺杆菌感染（Helicobacter pylori，HP）、癌前病变以及遗传和基因等因素均与胃癌的发生、发展密切相关。分子生物学的研究显示，胃癌的癌变涉及癌基因、抑癌基因、凋亡相关基因与转移相关基因等的改变，而基因改变的形式也是多种多样的，这些基因受一系列复杂机制调控，但是其确切的调控机制并不完全明了。

1977年美国学者闵锡钧根据显微镜下胃癌生长方式的不同将其分为膨胀型和浸润型两型（Ming氏分型），并且指出二者的生物学行为和临床预后截然不同。该分类方法很好地反映了胃癌的生物学行为，且与预后密切相关，受到国内外临床专家和学者们的公认。膨胀型胃癌癌组织呈膨胀性生长，集聚成团块状，周围纤维结缔组织增生（Desmoplasia），边界较为清楚。浸润型胃癌癌组织呈浸润性生长，分散成条索状，不形成团块状，与周围组织无明显的界限，多为低分化腺癌或印戒细胞癌。膨胀型术后5年存活率为27.4%,而浸润型仅为9.1%。迄今为止，国内外对于这方面的研究鲜有报道，两型胃癌（Ming氏膨胀型和浸润型）的发病机制和形成的分子基础更不清楚。

目前世界范围内报道的胃癌细胞系已经不少：中国的BGC-823、SGC-7901、MGC-803；美国的AGS、HS764T、SNU-1；欧洲的AGS、KATO-III、HGC-27；日本的MKN-1、MKN-28、MKN-45、MKN-74、NMG C-3、NMG C-4、AZ-521；韩国的SNU-1、SNU-5、SNU-16等。其中大部分来源于转移的淋巴结、腹水或晚期、低分化的肿瘤组织，用这些细胞系做胃癌研究缺乏很好的代表性和科学性；另一方面很多细胞系应用至今已经有几十年的时间，在长期、反复的传代培养过程中，细胞特性会发生很大变化，不同实验室在用同种细胞的不同代次得到的数据相差会很大，结果缺乏可比性和重复性。基于以上原因，胃癌原代细胞培养并建立细胞系在现阶段仍有很大的价值。

另有研究发现，虽然各个细胞系在体外保持了许多起源细胞的形态与功能特征，但是由于周围环境的变化，这些细胞系与供体的起源细胞会存在程度不一的差异，这种差异在培养开始就存在，只是程度相对较小，以后随着不断的传代培养及变异的发生，这种差异会越来越大，甚至会产生起源细胞本不具备的特征。由于这些因素的存在，不同细胞系的建立工作更显得意义重大。

迄今世界上关于胃癌的临床和基础研究已有很多的报道，但从Ming氏分型角度去研究胃癌发生机制的报道却不多，Ming氏胃癌细胞系也未见报道。

中国专利CN101993854A公开一种来源于肝转移灶的大肠癌细胞系CJF及其构建方法，所述细胞系由如下方法获得：取大肠癌肝转移灶的组织，用胶原酶/透明质酸酶消化成单细胞后，MACS分选出CD133+细胞接种于NOD/SCID鼠皮下，成瘤后取出肿瘤组织，经体外培养获得可稳定传代的富含大肠癌干细胞的大肠癌细胞系CJF。该发明CJF细胞是从结肠癌人肝转移灶取材的，对大肠癌肝转移的研究有其他大肠癌细胞系无法比拟的优点；该发明CJF细胞稳定表达CD133+的细胞亚群约为10％，这株细胞系在大肠癌肝转移过程及肿瘤干细胞在转移机制中的作用研究具有广泛的应用前景。

发明内容

本发明的目的是提供一株Ming氏人膨胀型胃癌细胞系及其应用。

本发明所述Ming氏人膨胀型胃癌细胞系为Ming氏人膨胀型胃癌细胞株XGC-2，已于2013年6月6日保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国，武汉，武汉大学，保藏编号为CCTCC NO：C201386。