[发明专利]一种测定化妆品中氯霉素类抗生素的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种氯霉素类抗生素的测定方法，特别是涉及一种同时测定化妆品中3种氯霉素类抗生素的方法。

背景技术

氯霉素，是由委内瑞拉链丝菌产生的抗生素，属抑菌性广谱抗生素。在甲醇、乙醇、丙二醇中易溶，在水中微溶。在弱酸性或中性溶液中较稳定，在碱性溶液中易破坏。因其对造血系统有严重不良反应，需慎重使用。甲砜霉素，别名硫霉素，是氯霉素的同类物，抗菌谱和抗菌作用与氯霉素相仿。氟甲砜霉素，又名氟苯尼考、氟洛芬或氟氯霉素，是甲砜霉素的单氟衍生物。《化妆品卫生规范》（2007年版）明确规定氯霉素等抗生素为化妆品中的禁用物质。

发明内容

本发明的目的是提供一种化妆品中氯霉素类抗生素的测定方法。

本发明的又一目的是提供一种同时测定化妆品中氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素的方法。

一种测定化妆品中氯霉素类抗生素的方法，包括如下步骤：

向待测化妆品中加入甲醇涡旋振荡，进行超声提取，提取液离心，取上清液经微孔滤膜过滤，滤液采用高效液相色谱-串联四极杆质谱分析方法进行测定；其中，所述方法中采用A和B的混合溶液作为流动相进行洗脱，A为乙腈，B为水。

本发明所述的测定化妆品中氯霉素类抗生素的方法，其中所述测定方法同时检测化妆品中氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素3种氯霉素类抗生素。

本发明所述的测定化妆品中氯霉素类抗生素的方法，其中所述方法的色谱条件为：

色谱柱：XBridge Phenyl，3.5μm，2.1mm×150mm内径；柱温：35℃；进样量：5μL；

所述流动相的流速为0.3mL/min；所述洗脱程序为：0～3min，流动相中B的体积百分比为80%；3～6min，流动相中的B体积百分比由80%下降到40%；6～8min，流动相中B的体积百分比由40%下降到10%；8～8.1min，流动相中B的体积百分比由10%上升到80%；8.1～10min，流动相中B的体积百分比为80%。

本发明所述的测定化妆品中氯霉素类抗生素的方法，其中所述方法的质谱条件为：

离子化方式：ESI-；毛细管电压：-2.5kV；脱溶剂气温度：500℃；脱溶剂气流速：1000L/Hr；锥孔气体流速：50L/Hr；离子源温度：150℃；萃取电压：-3.00V；射频透镜电压：-0.10V；碰撞气体：氩气；数据采集模式：MRM。

本发明所述的测定化妆品中氯霉素类抗生素的方法，其中所述氯霉素的定量限为5μg/kg，所述氟甲砜霉素的定量限为10μg/kg，所述甲砜霉素的定量限为20μg/kg。

本发明所述的测定化妆品中氯霉素类抗生素的方法，其中，0.5g所述待测试样中加入10mL甲醇，涡旋振荡30s，在超声波清洗仪中超声提取20min，取部分溶液置于离心管中，在离心机上以5000rpm高速离心10min后，取上清液过0.2μm微孔滤膜，滤液供上机测定。

本发明所述的测定化妆品中氯霉素类抗生素的方法与现有技术不同之处在于：

本发明建立了化妆品中3种禁用氯霉素类抗生素的高效液相色谱-串联四极杆质谱分析方法：样品采用加入甲醇涡旋振荡、超声提取后，提取液经高速离心处理，上清液过0.2μm微孔滤膜，滤液以XBridge Phenyl（3.5μm，2.1×150mm）色谱柱分离后以HPLC-MS/MS多反应监测模式进行定性及定量分析；化妆品中氯霉素的定量限为5μg/kg，在5～50μg/kg3个添加水平范围内，水剂和膏霜类样品的平均回收率分别为80.56～111.29%和81.88～107.00%，相对标准偏差为4.84～12.09%；氟甲砜霉素的定量限为10μg/kg，在10～100μg/kg3个添加水平范围内，水剂和膏霜类样品的平均回收率分别为82.30～112.09%和81.26～115.75%，相对标准偏差为5.43～13.68%；甲砜霉素的定量限为20μg/kg，在20～200μg/kg3个添加水平范围内，水剂和膏霜类样品的平均回收率分别为83.49～115.53%和81.55～117.39%，相对标准偏差为6.03～10.81%。本发明所述方法可以同时检测化妆品中氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素3种氯霉素类抗生素，快速简便，不需要单独测定其中每一种，节省了时间也节约了成本。本发明建立的化妆品中3种氯霉素类抗生素的测定方法准确、快速、简便且灵敏度高，可以为化妆品的检验工作和日常生产的质量控制提供科学依据和技术支持。

下面结合附图对本发明所述的测定化妆品中氯霉素类抗生素的方法作进一步说明。

附图说明