[发明专利]一种车前醚苷的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，尤其是涉及一种车前醚苷的制备方法。

背景技术

毛子草又叫唢呐花，紫葳科植物，味苦、凉，具有祛风除湿、消炎止痛、活血散瘀的功效。现代研究发现，毛子草中含有生物碱、黄酮类及萜苷类物质，其中车前醚苷为毛子草中药用成分，具有神经营养作用。

车前醚苷为无色粉末（易吸潮），易于甲醇，分子式C16H24O9，分子式359，分子结构式：

通过文献检索，现有车前醚苷的制备方法多采用硅胶柱层析法。如文献“苗药毛子草化学成分及药理研究”和专利“从结石草中提取纯化车前醚苷的方法及其产品和应用”都公开的方法是大孔树脂及硅胶柱分离法制备。此类方法操作复杂，溶剂用量大，产品收率低，而且重现性差。

发明内容

本发明的目的是解决现有技术不足和缺陷，提供一种操作简单的车前醚苷的制备方法。

本发明的目的是采用以下技术方案实现的：一种车前醚苷的制备方法，其特征在于包含以下步骤：

1）取干燥毛子草叶粉碎，加入5-10倍量50%-90%乙醇溶液超声提取，提取液减压浓缩至无醇，加适量水稀释后用超滤膜超滤，透过液再用纳滤膜浓缩，浓缩液依次用氯仿、乙酸乙酯萃取，收集萃余液，浓缩成浸膏；

2）上述浸膏采用高速逆流色谱仪分离，以乙酸乙酯、正丁醇和水为溶剂系统，紫外检测器在线检测，收集流分，减压浓缩，低温干燥即得。

所述步骤1）中的超滤膜为截留3000-10000的中空纤维素膜，纳滤膜为截留分子量不大于300的分子量中空纤维素纳滤膜。

所述步骤2）中的乙酸乙酯、正丁醇和水为溶剂系统比例为：2-5:1-3:2-5，取上相做固定相，下相做流动相。

采用本方法制备车前醚苷，工艺操作简单，产品收率高，而且污染小，适合高纯度产品车前醚苷的生产。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

取毛子草5kg粉碎，加入8倍量70%乙醇溶液超声提取3次，每次30min，提取液减压浓缩至无醇，加适量水稀释后用截留分子量3000的超滤膜超滤，透过液再用截留分子量300纳滤膜浓缩，浓缩液依次用等体积氯仿、乙酸乙酯萃取，收集萃余液，浓缩成浸膏。取乙酸乙酯、正丁醇和水为溶剂系统，按2:1:2比例混合，取上相做固定相，下相做流动相，设置转速900rpm，流动相溶解浸膏，进样，紫外检测器在线检测，收集流分，连续制备，合并流分减压浓缩，低温干燥，得车前醚苷12g，经HPLC检测，含量98.2%。

实施例2：

取毛子草5kg粉碎，加入5倍量60%乙醇溶液超声提取3次，每次30min，提取液减压浓缩至无醇，加适量水稀释后用截留分子量6000的超滤膜超滤，透过液再用截留分子量200纳滤膜浓缩，浓缩液依次用等体积氯仿、乙酸乙酯萃取，收集萃余液，浓缩成浸膏。取乙酸乙酯、正丁醇和水为溶剂系统，按3:1:2比例混合，取上相做固定相，下相做流动相，设置转速800rpm，流动相溶解浸膏，进样，紫外检测器在线检测，收集流分，连续制备，合并流分减压浓缩，低温干燥，得车前醚苷13g，经HPLC检测，含量96.7%。

实施例3：

取毛子草5kg粉碎，加入10倍量50%乙醇溶液超声提取2次，每次30min，提取液减压浓缩至无醇，加适量水稀释后用截留分子量10000的超滤膜超滤，透过液再用截留分子量300纳滤膜浓缩，浓缩液依次用等体积氯仿、乙酸乙酯萃取，收集萃余液，浓缩成浸膏。取乙酸乙酯、正丁醇和水为溶剂系统，按5:2:5比例混合，取上相做固定相，下相做流动相，设置转速850rpm，流动相溶解浸膏，进样，紫外检测器在线检测，收集流分，连续制备，合并流分减压浓缩，低温干燥，得车前醚苷12.5g，经HPLC检测，含量97.1%。