[发明专利]四氢吡啶连吲哚-单克隆抗体CD33结合物和CD34结合物及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及N-取代四氢吡啶连-5-取代吲哚-单克隆抗体CD33结合物（简写为CD33-TPI）和N-取代四氢吡啶连-5-取代吲哚-单克隆抗体CD34结合物（简写为CD34-TPI），以及这两种结合物的制备方法和作为治疗白血病药物的先导化合物的应用。属于化学生物药物领域，

背景技术

白血病是当今世界上死亡率最高的疾病之一，据中国发布的流行病学统计，目前我国至少有400万白血病患者，每年新增约4万名。白血病是一类造血细胞恶性疾患，好发于青少年，其发病率排在青少年肿瘤的第一位，所以对人类的危害更为明显和突出。

除了早幼粒细胞白血病以外，目前对于其它类型的白血病均缺乏特效的治疗手段，仍然采用化疗的方法来治疗这种恶性疾患，化疗药物的共同的缺点是选择性不强，对正常细胞和肿瘤细胞具有几乎相同的杀伤作用。所以，毒性较大,对骨髓、消化道细胞和生殖细胞也有很强的杀伤作用。更棘手的是，大多数复发患者的白血病细胞常常对现有的化疗药物产生耐药。

为解决上述问题,近年来单克隆抗体(简称单抗)药物用于治疗肿瘤的研究已获得重要进展。研究表明,单抗药物对肿瘤细胞有选择性杀伤作用并在动物实验有显著的疗效。由于单抗有高度特异性,所以单抗药物将在肿瘤治疗中发挥重要作用，研制单抗药物有巨大的潜力。

据公开号为CN102276581A的专利报道，N-取代四氢吡啶连-5-取代吲哚化合物（代号为TPI）（Ⅰ）具有高效抑制人白血病KG-1a细胞系增殖的活性，但其选择性不高，对正常细胞有一定的毒性。在一定程度上限制了该类化合物在治疗白血病药物中的应用。

据文献报道，编码为CD33的单克隆抗体（简称单抗CD33）和编码为CD34的单克隆抗体（简称单抗CD34）对人白血病KG-1a等细胞系具有高度特异性,将其与具有高效抑制人白血病K562细胞系增殖活性的N-取代四氢吡啶连-5-取代吲哚化合物（简称TPI）结合，制成TPI与单抗CD33结合的单抗药物先导化合物（简称为CD33-TPI）（Ⅱ），和TPI与单抗CD34结合的单抗药物先导化合物（简称为CD34-TPI）（Ⅲ），使CD33-TPI和CD34-TPI能靶向于特定的肿瘤细胞，大大降低其对正常组织细胞的毒性。为此，单抗药物先导化合物CD34-TPI（Ⅱ）和CD34-TPI（Ⅲ），有望成为极具临床应用潜力的抗癌新药。

发明内容

本发明目的是为了提供N-取代四氢吡啶连-5-取代吲哚-单克隆抗体CD33结合物（简称为CD33-TPI）和N-取代四氢吡啶连-5-取代吲哚-单克隆抗体CD34结合物（简称为CD34-TPI），CD33-TPI和CD34-TPI均可作为治疗白血病的单抗药物的先导化合物。

本发明的第二个目的是为了提供上述两种N-取代四氢吡啶连-5-取代吲哚-单克隆抗体CD33和CD34结合物CD33-TPI和CD34-TPI的制备方法。

本发明的第三个目的是将CD33-TPI和CD34-TPI用于制备治疗白血病的药物。结合物CD33-TPI和CD34-TPI具有高效抑制人白血病KG-1a细胞系增殖的生物活性，且CD33-TPI和CD34-TPI体内急性毒性低，对小鼠正常骨髓细胞的毒性较低。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

N-取代四氢吡啶连-5-取代吲哚-单克隆抗体CD33结合物（CD33-TPI）和CD34结合物（CD34-TPI），其结构式如式（Ⅱ）和式（Ⅲ）所示：

在式（Ⅱ）和式（Ⅲ）中：

R₁为：氢、溴、C₁-C₃的烃基和C₁-C₃烃氧基中的一种；

R₂为：苯基、取代苯基、2-四氢呋喃基中的一种。其中取代基为氟、C₁-C₃的烃基和C₁-C₃烃氧基中的一种。

mCD33是指编码为CD33的单克隆抗体，简称单抗CD33。

mCD34是指编码为CD34的单克隆抗体，简称单抗CD34。

上述N-取代四氢吡啶连-5-取代吲哚-单克隆抗体CD33结合物和CD33结合物的制备方法，具体步骤为：