[发明专利]一种用于检测石渠棘球绦虫(蚴)的检测试剂盒

说明书

技术领域

 本发明涉及一种用于检测被检样品中是否有寄生虫的检测试剂盒，特别是一种用于检测石渠棘球绦虫(蚴)的检测试剂盒。

背景技术

棘球蚴病（Echinococcosis），又称包虫病（hydatid disease）是由棘球属（Echinococcus）绦虫的幼虫—棘球蚴（echinococcus or hydatid cyst）寄生于动物（包括人）体内，引起一类人畜共患寄生虫病，该病不仅严重危害人体健康，而且阻碍畜牧业发展，每年造成的经济损失上亿元。该病呈世界性分布，而我国是主要的高发区。石渠棘球绦虫（Echinococcus. shiquicus, Es）是棘球属绦虫种的新发现种，因2005年首次在四川石渠地区发现而得名，该绦虫与棘球属中的多房棘球绦虫形态上相似，主要寄生在狐狸及高原属兔内(Xiao N, Qiu J, Nakao M, et al. Echinococcus shiquicus n. Sp., a taeniid cestode from Tibetan fox and plateau pika in China. Int J Parasitol, 2005, 35(6): 693-701.)。目前的研究报道表明，该物种主要在我国青藏高原的野生动物体之间存在和流行，世界其他国家及地区均无该物种的发现报道，也无人及家养动物感染的相关报道，但这并不能证明该物种不感染人或家养动物并在这些物种间流行传播。因此，建立一种快速有效的石渠棘球绦虫(蚴)的检测方法对了解该地区石渠棘球绦虫(蚴)的感染状况，并制定和采取相应的预防和控制措施具有重要的意义。

然而，已有的石渠棘球绦虫(蚴)的检测方法主要是常规的病原学检测法，即剖检感染动物，在显微镜下对寄生宿主肠道粪便进行虫体或虫卵及肝肺寄生的囊尾蚴的检测。该方法存在费时费力，敏感性和特异性都较低等缺陷，并且还具有感染人和周围环境的危险。而对于该物种的分子生物学检测方法还较少，并且存在特异性差、灵敏性偏低和操作繁琐的问题。

发明内容

本发明提供一种用于检测石渠棘球绦虫(蚴)的检测试剂盒。

本发明的一种用于检测石渠棘球绦虫(蚴)的检测试剂盒内包括有SEQ ID №1、SEQ ID №2、SEQ ID №3和SEQ ID №4四条引物，或者检测试剂盒内包括有特异性引物的反应混合物，特异性引物反应混合物由SEQ ID №1和SEQ ID №2各40pmol和SEQ ID №3和SEQ ID №4各5pmol构成。

为方便使用，本发明的用于检测石渠棘球绦虫(蚴)的检测试剂盒内还有LAMP buffer缓冲液；dNTP混合液；Bst DNA 聚合酶；标准石渠棘球绦虫(蚴)阳性基因组DNA；6×或SYBR GreenⅠ显色剂，其中的上样缓冲液由0.25%溴酚蓝，0.25%二甲苯青，40%蔗糖水溶液构成，缓冲液中的各组分比例为容积比。

本发明的试剂盒实际上是一种LAMP检测试剂盒，LAMP是环介导的恒温扩增技术(Loop-mediated isotheral amplification method, LAMP），它是在2000年由Notomi T.等发明了一种高敏感性的DNA扩增技术（Notomi, T., Okayama, H., Masubuchi, H., Yonekawa, T., Watanabe, K., Amino, N., Hase, T., 2000. Loop-mediated isothermal amplification of DNA. Nucleic Acids Research 28, E63.），到目前为止，尚无应用LAMP方法检测石渠棘球绦虫(蚴)病原的报道。