[发明专利]一种高车前素的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，特别涉及一种鸡蛋花素的制备方法。

背景技术

高车前素化学名4',5,7-三羟基-6-甲氧基黄酮，属于黄酮类物质，CAS号1447-88-7分子式C16H12O6，分子量300.26，分子结构式：

    高车前素溶于二甲基亚砜、碱性溶液、微溶于水、醇、丙酮，不溶于苯、乙醚、石油醚，黄色针状结晶(由甲醇中结晶)。

     荔枝草唇形科鼠尾草属植物荔枝草Salvia plebeia R· Brown的全草，全草含原儿茶酸、高车前苷、高车前草素等多种黄酮类成分，具有清热，解毒，凉血，利尿等功效。用于咽喉肿痛、支气管炎、肾炎水肿、痈肿；外治乳腺炎、痔疮肿痛、出血。

     通过文献检索，现有从荔枝草中制备高车前草素的方法，多采用萃取法和硅胶柱分离，分离过程复杂，收率低，不适合工业化生产。

发明内容

本发明的目的是解决现有技术不足和缺陷，提供一种操作简便的高车前素的制备方法。

本发明的目的是这样来实现的：一种高车前素的制备方法，其特征在于：取荔枝草粉碎，加入6-10倍量50%-90%乙醇溶液回流提取2-3次，提取液减压浓缩至无醇调节ph3-5加入生物酶酶解20-30小时，酶解液加入大孔树脂柱吸附，用乙醇溶液梯度洗脱，洗脱液浓缩调节ph1-3放置结晶，结晶物滤出，用10倍95%乙醇溶液溶解，加入适量碱水溶液至完全溶解后调节PH3-4放置结晶，结晶物滤出，再用丙酮溶液重结晶即得。

    所述生物酶可选纤维素酶、淀粉酶和果胶酶的中的一种，用量为原料量的1-5‰。

    所述的大孔树脂型号可选HZ816、ADS-7、AB-8和HPD100中的一种。

所述的乙醇溶液梯度洗脱为：先用3-5倍柱体积20-50%乙醇溶液洗脱，再用5-10倍量60-90%乙醇溶液洗脱。

采用本发明制备高车前素，方法操作简单，污染小，能耗低，易于工业化生产。

具体实施方式：

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

实施例1：

取10kg荔枝草粉碎，加入8倍量60%乙醇溶液回流提取3次，提取液减压浓缩至无醇，盐酸调节至ph3，加入纤维素酶20g，在温度40℃酶解30小时后加入HZ816大孔树脂柱吸附，先用5倍柱体积20%乙醇溶液洗脱，再用7倍量70%乙醇溶液洗脱，洗脱液浓缩调节至ph1放置结晶。结晶物滤出用10倍95%乙醇溶液加热溶解，用10%氢氧化钠水溶液至完全溶解后调节至PH3放置结晶，结晶物滤出，再用丙酮溶液重结晶2次，干燥得淡黄色结晶车前草素20g，经HPLC检测，含量98.1%。

实施例2：

取10kg荔枝草粉碎，加入10倍量50%乙醇溶液回流提取2次，提取液减压浓缩至无醇，盐酸调节至ph4，加入淀粉酶30g，在温度50℃酶解20小时后加入ADS-7大孔树脂柱吸附，先用5倍柱体积40%乙醇溶液洗脱，再用10倍量60%乙醇溶液洗脱，洗脱液浓缩调节至ph3放置结晶。结晶物滤出用10倍95%乙醇溶液加热溶解，用5%氢氧化钠水溶液至完全溶解后调节至PH4放置结晶，结晶物滤出，再用丙酮溶液重结晶2次，干燥得淡黄色结晶车前草素22g，经HPLC检测，含量97.6%。

实施例3：

取10kg荔枝草粉碎，加入5倍量70%乙醇溶液回流提取3次，提取液减压浓缩至无醇，盐酸调节至ph5，加入果胶酶35g，在温度50℃酶解20小时后加入AB-8大孔树脂柱吸附，先用4倍柱体积30%乙醇溶液洗脱，再用8倍量70%乙醇溶液洗脱，洗脱液浓缩调节至ph2放置结晶。结晶物滤出用10倍95%乙醇溶液加热溶解，用20%氢氧化钠水溶液至完全溶解后调节至PH3放置结晶，结晶物滤出，再用丙酮溶液重结晶3次，干燥得淡黄色结晶车前草素17g，经HPLC检测，含量98.5%。

实施例4：

取10kg荔枝草粉碎，加入10倍量70%乙醇溶液回流提取2次，提取液减压浓缩至无醇，盐酸调节至ph4，加入淀粉酶35g，在温度50℃酶解20小时后加入HPD100大孔树脂柱吸附，先用3倍柱体积20%乙醇溶液洗脱，再用8倍量60%乙醇溶液洗脱，洗脱液浓缩调节至ph2放置结晶。结晶物滤出用10倍95%乙醇溶液加热溶解，用10%氢氧化钠水溶液至完全溶解后调节至PH3放置结晶，结晶物滤出，再用丙酮溶液重结晶3次，干燥得淡黄色结晶车前草素19g，经HPLC检测，含量97.7%。