[发明专利]一种过氧乙酸残留的快速测定方法有效
申请号: | 201310336589.8 | 申请日: | 2013-08-05 |
公开(公告)号: | CN103439322A | 公开(公告)日: | 2013-12-11 |
发明(设计)人: | 邓金花;秦惠;黄报亮;吴清平 | 申请(专利权)人: | 广东环凯微生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N21/78 | 分类号: | G01N21/78 |
代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人: | 谭英强 |
地址: | 510663 广东省广州*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 过氧乙酸 残留 快速 测定 方法 | ||
技术领域
本发明属于生物技术酶法分析领域,特别涉及一种过氧乙酸残留的快速测定方法。
背景技术
过氧乙酸作为一种新型高效低毒的杀菌消毒剂主要应用于食品加工器具,医疗器械和用品等的消毒。随着环境的恶化,全球的肾病患者越来越多,据不完全统计,2008年我国的血透析患者已超过10万人,所以过氧乙酸应用在血透析方面的消毒显得尤为重要。血透析机一般1-3个月内需进行一次消毒,可采用0.2%的过氧乙酸循环20分钟,浸泡30分钟消毒;储水罐和管道一般15天需要进行一次消毒,可采用0.2%的过氧乙酸浸泡30分钟消毒,每次消毒后均需用反渗水反复冲洗并进行残留的测试,确保无过氧乙酸残留。
过氧乙酸残留检测目前尚缺乏被广泛认可的方法,因此开发出一种便捷、灵敏度高、可靠性强的过氧乙酸残留测试产品迫在眉睫。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足,提供一种过氧乙酸残留的快速测定方法。
本发明所采取的技术方案是:
一种过氧乙酸残留的快速测定方法,包括以下步骤:将过氧乙酸残留快速测定试纸浸入待测样品制成的试液中,2秒后取出,甩去试纸上多余的溶液,显色完全后,将试纸所显的颜色与标准比色卡相比较,读出过氧乙酸残留的浓度数据;
其中,过氧乙酸残留快速测定试纸由以下方法制备:用纯水将辣根过氧化物酶、显色剂、pH调节剂、蛋白酶保护剂配制成混合液,将滤纸在混合液中浸泡5~30min后取出,烘干成形,裁切至设定尺寸,粘贴在底板上,制得用于测定过氧乙酸残留的试纸;所述混合液中,辣根过氧化物酶的浓度为0.01~0.10g/L,显色剂的浓度为1.0~2.0g/L。
优选的,所述显色剂为四甲基联苯胺盐酸盐、四甲基联苯胺硫酸盐、四甲基联苯胺丙磺酸盐或2,2-联氮基双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐。
优选的,所述蛋白酶保护剂为糖、氨基酸、蛋白质和聚合物的混合物。
优选的,所述蛋白酶保护剂中,糖为蔗糖、海藻糖中的至少一种;氨基酸为甘氨酸、谷氨酸、精氨酸中的至少一种;蛋白质为牛血清蛋白、人血清白蛋白中的至少一种;聚合物为聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮中的至少一种。
优选的,所述蛋白酶保护剂中,糖为海藻糖,氨基酸为甘氨酸,蛋白质为人血清白蛋白,聚合物为聚乙二醇。
优选的,所述混合液中,糖的浓度为4~20g/L,氨基酸的浓度为2~10g/L,蛋白质的浓度为1~5g/L,聚合物的浓度为4~20g/L。
优选的,所述pH调节剂为柠檬酸与磷酸氢二钠的混合物,混合液中,柠檬酸的浓度为0.028~0.044mol/L,磷酸氢二钠的浓度为0.11~0.14 mol/L。
所述标准比色卡,由以下方法制备:
1) 用纯水配制浓度为0.5mg/L的过氧乙酸标准溶液,将过氧乙酸残留快速测定试纸浸入标准溶液中,2秒后取出,甩去多余的溶液,待试纸所呈现的颜色稳定后,在潘通色卡上找出对应的标准色;
2) 同步骤1)所述方法,分别获得检测浓度为1mg/L、2mg/L、4mg/L、10mg/L、20mg/L、40mg/L的过氧乙酸标准溶液时试纸所呈现的标准色;
3) 根据各标准色的色值制备得到标准比色卡。
本发明的有益效果是:
本发明提供了一种灵敏度高、稳定性好、操作简便、经济实用的能现场快速检测样品中残留过氧乙酸含量的方法,该方法响应时间快,不超过15秒,试纸检测灵敏度高,最低可检测过氧乙酸的含量为0.5mg/L。
本发明方法所用试纸中的pH调节剂即可保持辣根过氧化物酶的活性也可缓冲试样的pH,保证了测试结果的准确性;试纸中的酶保护剂保证了酶试纸的稳定性,在室温的条件下,避光密闭保存,保质期至少可达到12个月;试纸的面积小,单次测试试剂用量只有普通实验室方法的几百分之一,且测试过程简单,无需其它仪器和配件,可大大节约测试成本;试纸的可持式底板可防止拿取的过程中受人手的污染,十分安全可靠。
附图说明
图1为标准比色卡1#的视图。
具体实施方式
一种过氧乙酸残留的快速测定方法,包括以下步骤:将过氧乙酸残留快速测定试纸浸入待测样品制成的试液中,2秒后取出,甩去试纸上多余的溶液,显色完全后,将试纸所显的颜色与标准比色卡相比较,读出过氧乙酸残留的浓度数据;
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