[发明专利]一种醋酸奥曲肽的多肽合成方法

说明书

本发明涉及一种醋酸奥曲肽的多肽合成方法，包括如下步骤：以氯甲基树脂为起始原料，将Boc‑Thr(tBu)‑OH制备成铯盐，按照固相合成的方法依次连接具有保护基团的氨基酸，获得保护八肽树脂，其间依次用HCl/异丙醇脱去Boc保护基团，用DIC、HOBT为缩合剂进行接肽反应，用钯碳/氢气还原，同时将肽链切落，获得还原型奥曲肽，在Ph7.8‑9条件下通空气使二硫键成环，获得奥曲肽粗品，再经C18柱分离纯化，制得醋酸奥曲肽精品。本发明方法不采用苏氨醇、Fmoc‑苏氨醇，生产成本极低，具备规模化生产能力，工艺稳定，原辅料来源方便，生产周期短，接肽收率高，质量稳定，避免使用氟化氢，三氟乙酸等剧毒试剂，三废污染少。

技术领域

本发明涉及一种醋酸奥曲肽的多肽合成方法，具体涉及醋酸奥曲肽的固相多肽合成方法。

背景技术

奥曲肽，中文名：醋酸奥曲肽；英文名：Octreotide Acetate；分子式:C₄₉H₆₆N₁₀0₁₀S₂·XC₂H₄O₂；结构式:

醋酸奥曲肽能抑制多种胃肠道激素的分泌及其它多种内分泌功能，目前已广泛用于临床治疗各型胰腺炎、胰腺瘘管、肠瘘、肝硬化食道-胃底曲张静脉出血、消化道溃疡出血、严重腹泻及肢端肥大症，并有望用于消化系统内分泌肿瘤的治疗。

在国内，肝硬化发病率超过1%，每年发生食管曲张静脉破裂引起的大出血的患者，加上消化性溃疡引起的上消化道大出血患者，总数超过300万，因此醋酸奥曲肽的市场较大。我们将致力于降低醋酸奥曲肽的生产成本，大大降低患者的治疗成本。

目前文献报导的醋酸奥曲肽的制备方法一般需使用苏氨醇或Fmoc-苏氨醇，导致生产成本较高；在并使用氟化氢切肽、三氟醋酸进行纯化，污染环境，收率较低。因此目前的方法限制了醋酸奥曲肽的大规模生产和使用。

不同的多肽产品由于受其自身结构的制约，在合成工艺上存在一些局限性，不能任意选择起始原料和工艺条件完成多肽合成。虽然使用Boc-保护的氨基酸可以实现某些多肽产品的合成，但是现有技术中尚没有开发出采用Boc-苏氨酸制备醋酸奥曲肽的工艺技术，而Boc-苏氨酸相较Fmoc-苏氨醇，价格低廉，使用Boc-苏氨酸来合成醋酸奥曲肽，将极大降低醋酸奥曲肽的生产成本，有益于醋酸奥曲肽的大规模生产和使用。

发明内容

本发明的目的是提供一种醋酸奥曲肽的多肽合成方法，大幅度减少三废和降低原料成本，提高反应收率，以克服现有技术存在的上述缺陷。

为了实现上述目的，本发明的技术方案如下：

一种醋酸奥曲肽的多肽合成方法，包括如下步骤：以氯甲基树脂为起始原料，将Boc-Thr(tBu)-OH制备成铯盐，按照固相合成的方法依次连接具有保护基团的氨基酸，依次为：Boc-Cys(Trt)-OH、Boc-Thr(tBu)-OH、Boc-Lys(Fmoc)-OH、Boc-D-Trp-OH、Boc-Phe-OH、Boc-Cys(Trt)-OH、Fmoc-D-Phe-OH，获得保护八肽树脂，其间依次用HCl/异丙醇脱去Boc-保护基团，用DIC、HOBT为缩合剂进行接肽反应，用钯碳/氢气还原，同时将肽链切落，获得还原型奥曲肽，在pH7.8-9的条件下通空气使二硫键成环，获得奥曲肽粗品，再采用独特的流动相经C18柱分离纯化，制得醋酸奥曲肽精品。

依次连接具有保护基团的氨基酸，获得保护八肽树脂，其间依次脱去Boc-保护基团的方法包括如下步骤：

（1）Boc-Thr(tBu)-OCs的制备

Boc-Thr(tBu)-OH溶于甲醇与水中，另取碳酸铯加水溶解至澄清，搅拌下加入上述Boc-Thr(tBu)-OH溶液，溶液pH7.5，减压浓缩至干，得糖浆状残留物Boc-Thr(tBu)-OCs ；