[发明专利]从葡萄中提取的谷氨酸脱羧酶及提取方法和生产γ-氨基丁酸的方法有效
| 申请号： | 201310333541.1 | 申请日： | 2013-08-02 |
| 公开（公告）号： | CN103409401A | 公开（公告）日： | 2013-11-27 |
| 发明（设计）人： | 庄义庆;吴琴燕;杨敬辉 | 申请（专利权）人： | 江苏丘陵地区镇江农业科学研究所 |
| 主分类号： | C12N9/88 | 分类号： | C12N9/88;C12P13/00 |
| 代理公司： | 江苏致邦律师事务所 32230 | 代理人： | 徐蓓 |
| 地址： | 212400 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 葡萄 提取 谷氨酸 脱羧酶 方法 生产 氨基 丁酸 | ||
1.从葡萄中提取谷氨酸脱羧酶的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）选择新鲜无腐的葡萄，清洗去泥土；
（2）将葡萄搅碎，使葡萄皮纤维长度不超过2mm，取残渣，加残渣质量1-3倍的pH5.5的磷酸缓冲溶液，浸提0.5-1小时，过滤，合并2次汁液；
（3）葡萄汁液中加入壳聚糖0.05-0.12%，混合均匀后，静置30min；
（4）在7000-10000rpm条件下离心10-15min，得到GAD酶液。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）选择新鲜无腐的葡萄，清洗去泥土；
（2）将葡萄搅碎，使葡萄皮纤维长度为1mm，取残渣，加残渣质量1倍的pH5.5的磷酸缓冲溶液，浸提1小时，过滤，合并2次汁液；
（3）葡萄汁液中加入壳聚糖0.1%，混合均匀后，静置30min；
（4）在10000rpm条件下离心15min，得到GAD酶液。
3.权利要求1或2所述的方法从葡萄中提取的谷氨酸脱羧酶。
4.利用权利要求3所述的谷氨酸脱羧酶生产γ-氨基丁酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：取GAD酶液为催化剂，50-200mg/100ml的谷氨酸为底物，加入0.1g/L的维生素B6溶液，在温度为37℃的条件下，反应30-60min，得到GABA产品；其中利用质量比为1%的氢氧化钠溶液调整谷氨酸溶液的pH为5.5；酶反应中GAD酶液、谷氨酸溶液、维生素B6溶液的体积比为1：2：1。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：取GAD酶液为催化剂，50mg/100ml的谷氨酸为底物，加入0.1g/L的维生素B6溶液，在温度为37℃的条件下，反应30min，得到GABA产品；其中利用质量比为1%的氢氧化钠溶液调整谷氨酸溶液的pH为5.5；酶反应中GAD酶液、谷氨酸溶液、维生素B6溶液的体积比为1：2：1。
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