[发明专利]用于食品中罗丹明B快速检测的表面增强拉曼光谱法及试剂配方与使用方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种色素类违禁添加物的快速检测技术，特别涉及一种采用基质固相分散前处理技术进行食品中罗丹明B快速检测的表面增强拉曼光谱方法。 

背景技术

食品安全问题已成为全球关注的焦点，食品安全事件波及面广，造成的社会影响和经济损失巨大，也对人类生活环境乃至健康安全构成越来越严重的威胁。苏丹红事件、吊白块事件以及红心鸭蛋风波，引起了国内外的广泛关注。一次次的食品安全问题和危机检验着食品监管部门的能力，如何保障食品安全成为全社会共同关注的问题。 

罗丹明B是一种具有鲜桃红色的人工合成染料，主要被用于皮革、纺织、制漆和造纸等工业产品的染色，同时它作为一种常用的分析试剂，也被广泛地应用在医药、环保和矿业等领域中。因其具有潜在的致癌、致畸和致突变作用，目前已经被各个国家作为禁止在食品中出现的物质，中国卫生部在2008年将罗丹明B列入《食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂品种名单(第一批)》。然而，许多不法商贩受利于驱使，违法将罗丹明B掺入辣椒制品中以使颜色鲜亮，欺诈消费者。针对罗丹明B检测，目前主要采用高效液相色谱法和高效液相色谱串联质谱法，通常采用液液萃取和固相萃取前处理方式，所需仪器价格较昂贵，操作较复杂，难于普及推广，且前处理操作复杂，时间冗长，有机溶剂污染环境。 

对于常见的快速检测技术，往往缺乏配套的样品前处理技术，导致基质干扰严重，检测结果不准确，不能对违禁非法添加样品进行准确、可靠的检测与控制。 

发明内容

本发明的目的是提供一种食品(如辣椒油、辣椒酱等)中非法添加物罗丹明B的快速检测方法，采用基质固相分散前处理技术和表面增强拉曼光谱法对食品中是否添加了罗丹明B进行快速检测，成本低廉，可现场应用。 

为适应上述需求，本发明提供简单的食品(如辣椒油、辣椒酱)前处理方法，提供检测试剂配方及其制备方法，提供罗丹明B现场快速的定性和定量分析方法。其步骤如下： 

1.提取 

以中性氧化铝作为分散剂，称取辣椒油2.0g，中性氧化铝4.0g，按分散剂与辣椒油的重量比为1∶2进行混匀；称取辣椒酱2.0g，中性氧化铝6.0g，按分散剂与辣椒酱的重量比为1∶3进行混匀；在研钵中对以上混匀的试样进行充分研磨；将研磨好的试样转移至50mL离 心管中，加入提取剂，涡旋或摇振0.3～1分钟匀质后，超声10min，离心后，取上清液45℃氮吹至干，1mL水进行复溶后，过0.22μm滤膜过滤，滤液加入至预先加好一定量试剂A和B的检测池中。 

2.提取试剂配方及使用方法 

(1)辣椒油试样：20mL的80％甲醇水溶液； 

(2)辣椒酱试样：5mL的80％乙腈水溶液。 

3.检测 

将滤液加入至预先加好一定量试剂A和B的检测池中，涡旋或摇振均匀，置检测池于便拉曼光谱仪检测室中在200～2500cm^-1的范围内进行拉曼光谱扫描得到拉曼光谱图，拉曼谱图中如在1646cm^-1(波数误差＜15cm^-1)处有特征峰，则判断样品添加了罗丹明B，反之则判定样品没有添加罗丹明B。本发明的拉曼光谱法，所述水为二次蒸馏水或去离子水。 

4.试剂A为银胶体水溶液，按照公知的方法制备即可；试剂B为可使A凝聚的含Cl^-1的电介质，Cl^-1浓度范围为0.25M～0.65M，优选为0.55M；pH为1-9，优选为3。 

所述试剂的用量如下： 

(1)试剂A：100-300μL，优选为100μL； 

(2)试剂B：100-300μL，优选为100μL。 

(3)试样滤液的加样量：200-500μL，优选为400μL。 

5.本发明所述拉曼光谱仪的激光光源发射波长为785nm，是手持式、便携式或台式仪器。 

目前，中国检验检疫科学研究院、必达泰克公司可提供满足测试要求的便携式拉曼光谱仪。 

利用本发明时，后期的数据采集及结果分析步骤如下： 

(1)用便携式拉曼光谱仪进行检测，激光能量参数选择300mw，积分参数选择3次，这两个参数调节最佳拉曼峰强度，连续扫描拉曼光谱3次，最后得3次扫描光谱的平均光谱。每一个光谱的扫描范围是200-2500cm^-1，完成一个光谱扫描时间是1min。