[发明专利]一种利用固相微萃取检测油菜蜜香气成分的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种蜂蜜香气成分的检测方法，具体涉及一种利用固相微萃取技术对油菜蜜香气成分进行检测的方法。

背景技术

蜂蜜由于具有多种医疗保健功能，深受消费者青睐，近年来蜂蜜市场需求量也不断增加。由于单花蜜在品质、营养等方面均优于杂花蜜而深受消费者的青睐，一些不法商贩为获得高额利润，利用杂花蜜冒充单花蜜或者利用低价单花蜜冒充高价单花蜜，或者直接向单花蜜中掺入糖浆等外来甜物质。蜂蜜掺假事件已被媒体曝光多次，但蜂蜜掺假现象却从未停止，这是所有相关管理部门以及蜂蜜研究者必须深思的问题。究其原因主要是蜂蜜主要成分是葡萄糖和果糖，不同蜜源蜂蜜以及各种糖浆中的葡萄糖和果糖组成及比例非常相似，而存在差异的那些微量成分由于受蜜源、气候、采集年份、保存运输过程影响较大，因此给检测带来很大的问题。目前国内外已针对蜂蜜掺假开展了很多相关研究，也建立了一些蜂蜜掺假检测的方法，如碳稳定同位素分析法、高效液相色谱示差折光法、检测β-呋喃果糖苷酶方法、差热分析法、薄层色谱法等。但目前没有一种仅靠一种方法的检测就能确定是否掺假的方法，从而使得蜂蜜掺假现象屡禁不止，蜂蜜掺假必定会打乱蜂蜜正常的市场秩序，影响蜂蜜产业的长久发展，因此找到行之有效的蜂蜜掺假检测方法是蜂蜜产业亟待解决的问题。

蜂蜜香气主要来源于蜜源植物，是多种挥发性成分相互作用的结果，每种蜜源植物都有其特定的蜂蜜香气指纹图谱。通过蜂蜜香气的研究，可以将蜂蜜整体香气信息用一定的图谱或方程进行表征，以其作为不同蜜源蜂蜜的“特征标记”。而蜂蜜香气是多种挥发性成分共同作用的结果，不法商贩很难利用对此进行掺假。因此可以利用建立的“特征标记”进行蜜源、掺假鉴别。

蜂蜜香气成分属于挥发性物质，目前挥发性物质的提取方法主要有同时蒸馏萃取法、减压蒸馏萃取、液-液萃取、超临界CO₂萃取法、固相微萃取、动态顶空等方法。同时蒸馏萃取法、减压蒸馏萃取、液-液萃取、超临界CO₂萃取法在萃取挥发性物质时具有所需样品量大、费时、花费高、容易使挥发性成分变化等缺点，而固相微萃取和动态顶空无需有机溶剂、无需高温加热、操作简单、所需样品量少，是无损前处理技术，是新型的、对环境友好的样品前处理技术，倍受研究者关注。

油菜蜜是我国最大宗、最稳定的蜜种，全年约占蜂蜜总产量40%以上，利用油菜蜜的香气成分建立“特征标记”，可以对油菜蜜进行蜜源、掺假鉴别，目前尚无利用固相微萃取技术对油菜蜜香气成分进行检测的相关报道。

发明内容

本发明主要解决的技术问题是提供一种利用固相微萃取技术对油菜蜜香气成分进行检测的方法，该方法能较为全面、准确的测定油菜蜜中的香气成分。

本发明通过以下方法实现上述目的：

本发明采用固相微萃取提取蜂蜜香气成分，步骤包括：称取4-7mL油菜蜜，加入400mg氯化钠，将萃取头在气相色谱进样口老化 2h，老化温度为250℃，将老化好的萃取头插入样品瓶顶空部分，推出纤维头，在30-70℃条件下恒温磁力搅拌吸附30-60min，然后将萃取头插入GC-MS进样口，于250℃条件下解吸5min后进行气相色谱-质谱分析。

所述固相微萃取提取蜂蜜香气成分最佳条件为：称取6mL 油菜蜜，加入400mg氯化钠，将萃取头在气相色谱进样口老化 2h，老化温度为250℃，将老化好的萃取头插入样品瓶顶空部分，推出纤维头，在60℃条件下恒温磁力搅拌吸附50min，然后将萃取头插入GC-MS进样口，于250℃条件下解吸5min后进行气相色谱-质谱分析。

色谱条件：色谱柱为HP-5MS毛细管色谱柱30m×0.25mm×0.25μm；载气(He)流速1.5mL/min，不分流进样，进样口温度250℃；柱温：起始温度40℃，保持2min，然后以4℃/min 升温至156℃，保持2min，再以10℃/min升温至250℃，保持5min。

质谱条件：接口温度280℃，离子源温度230℃，电离方式EI，电子能量70eV，扫描质量范围35～500u，通过Agilent-MSD Chemstation工作站进行数据采集和处理。

所述萃取头采用美国Supelco公司生产的2cm 50/30μm DVB/CAR/PDMS萃取头；2cm是指涂层的长度，50/30μm 是涂层的厚度，即DVB/CAR复合的厚度是50μm，PDMS厚度是30μm。

所有实验重复3次，取平均值作为最终结果。