[发明专利]一种检测糖化白蛋白免疫层析试纸条及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及免疫检测技术领域，尤其涉及一种检测糖化白蛋白免疫层析试纸条及其制备方法。

背景技术

血糖监测是糖尿病日常诊治工作中非常重要的一个环节，良好的血糖控制能有效延缓糖尿病急、慢性并发症的发生和发展。临床工作中要使血糖全面长期达标，短期平均血糖的良好控制非常重要。糖化血清白蛋白（glycated albumin,GA）是临床上血糖监测的指标之一，对于评价糖尿病患者近期血糖控制情况及反映短期内血糖水平的变化具有较高的临床价值。

人体中葡萄糖与蛋白质发生非酶糖化反应即形成糖化蛋白。糖化血红蛋白（HbA1c）是血中葡萄糖与红细胞内的血红蛋白在其生命的120天内非酶促反应形成的一种糖蛋白，故可反映测定前2～3个月内患者的总体血糖水平，是国际上评价长期血糖控制的金标准，因血红蛋白半衰期长，其测定值难以反映患者近期血糖水平；果糖胺（GSP）是血清蛋白（主要是白蛋白）与葡萄糖发生非酶促反应的产物，由于白蛋白的半衰期为17～19天，故其值能反映测定前2～3周血糖的平均水平，是目前临床上用来判断短期血糖控制的指标。但由于GSP测定是反映血浆中总的糖化血浆蛋白质，其值易受血液中蛋白浓度、胆红素、乳糜和低分子物质等的影响，尤其在低蛋白血症和白蛋白转化异常的患者；由于血清中非特异性物质也可发生此反应，加之不同蛋白组分的非酶糖化反应率不同，故GSP检测法特异性差。而GA检测是在GSP的基础上对GA进行的定量测定，利用血清糖化白蛋白与血清白蛋白的百分比表示GA的水平，从而去除了血清白蛋白水平对检测结果的影响，因此GA较GSP更精确。

早在上世纪80年代，日本学者就研发了高压液相离子交换法（HPLC法）进行GA测定。HPLC法测定GA可准确检测患者短期内血糖控制的总体水平，但当时由于其代价高昂，处理样本量小，不适宜临床常规开展而未得到广泛应用。近年由日本开发研制的应用液态试剂的酶法检测GA（GA-L）是一种简单、快速、灵敏、准确定量的检测方法，是在固体酶法（2002年由美国研制的一种特异性较高的糖化血清白蛋白测定方法）测定糖化血清蛋白的基础上开发出液态试剂，减少了溶解处理，提高了操作性，加用糖化氨基酸以去除内源性糖化氨基酸对检测结果的影响，并利用对氧化性白蛋白特异性更高的溴甲酚紫替代原来的溴甲酚绿，减少了球蛋白对测定结果的影响，因此结果更为准确。GA-L检测具有良好的稀释直线性、日内重复性和日间稳定性，并与HPLC检测法有良好的一致性（r=0.879）。2005年Yamaguchi等（Yamaguchi M,Kambe S,Eto T,et al.Biosens Bioelectron,2005,21:426-432）报道了一种应用干性化学试剂的酶法测定GA的检测系统，该检测仪需血标本量小，可在5min之内测定GA数值，与GA-L比较，其检测精确性显示了良好的直线相关性（r=0.879）。

GA检测可准确全面地反映糖尿病患者短期的平均血糖水平及变化，具有重要临床价值。GA检测方法的改进，从上世纪最初应用的HPLC法，至近年开发研制的液态试剂法，乃至新近报道的干性酶法，检测方法逐步趋于简便、迅捷、精确和实用。临床上GA可作为糖尿病患者近期血糖及代谢情况的控制指标，对早期发现糖尿病、指导糖尿病的治疗有较大意义。

综上所述的方法，在一定程度上均存在着不少问题，亟待提出一种新方法来解决这些问题。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种检测糖化白蛋白免疫层析试纸条，其只需要微量的全血样本，即可在3～5分钟内实现定量检测糖化白蛋白的含量，大大提高了筛查的速度，具有灵敏度高、特异性好和结构简单的优点。

本发明的另一个目的是提供一种检测糖化白蛋白免疫层析试纸条的制备方法，其制备方法简单，易于大规模生产。

本发明的技术方案是这样实现的：

一种检测糖化白蛋白免疫层析试纸条，包括衬垫、设置于所述衬垫中部的分析膜、设置于所述分析膜上部一端的吸水垫、设置于所述分析膜上部另一端的结合物垫以及设置于所述结合物垫上部一端的样品垫，所述分析膜上设置有检测线和质控线，所述检测线包括糖化白蛋白检测线和白蛋白检测线，所述质控线、所述白蛋白检测线和所述糖化蛋白检测线沿着所述分析膜上部一端到另一端依次排列。

优选地，所述吸水垫与所述分析膜重叠1～2mm，所述结合物垫与所述分析膜重叠1～2mm，所述样品垫与所述结合物垫重叠1～2mm。

一种检测糖化白蛋白免疫层析试纸条的制备方法，包括如下步骤：