[发明专利]一种二价汞离子的检测方法

权利要求书

1.一种检测Hg²⁺浓度的方法，包括如下步骤：

1）将表面修饰了单链DNA分子A的倏逝波光纤传感探头甲伸入到含一末端经荧光素修饰的单链DNA分子B的系列不同浓度Hg²⁺的标准溶液中进行反应，使Hg²⁺与所述一末端经荧光素修饰的单链DNA分子B上的T-T碱基错配结构通过离子键形成T-Hg²⁺-T复合物，并使未形成T-Hg²⁺-T复合物的所述一末端经荧光素修饰的单链DNA分子B通过碱基互补配对的方式与所述单链DNA分子A相结合；

检测所述探头甲收集到的所述与所述单链DNA分子A相结合的所述一末端经荧光素修饰的单链DNA分子B发出的荧光强度信号值；

建立所述标准溶液中Hg²⁺浓度与所述荧光强度信号值的函数关系式；

2）将所述表面修饰了单链DNA分子A的倏逝波光纤传感探头乙伸入到含一末端经荧光素修饰的单链DNA分子B的待测溶液中进行反应，使Hg²⁺与所述单链DNA分子B上的T-T碱基错配结构通过离子键形成T-Hg²⁺-T复合物，并使未形成T-Hg²⁺-T复合物的所述一末端经荧光素修饰的单链DNA分子B通过碱基互补配对的方式与所述单链DNA分子A相结合；

检测所述探头乙收集到的所述与所述单链DNA分子A相结合的所述一末端经荧光素修饰的单链DNA分子B发出的荧光信号强度值X；

3）将所述荧光信号强度X代入所述函数关系式中，计算得到所述待测溶液中Hg²⁺浓度；

所述单链DNA分子B能与所述单链DNA分子A通过碱基互补配对而结合；所述单链DNA分子B上还含有能与Hg²⁺通过离子键形成T-Hg²⁺-T复合物的T-T碱基错配结构，形成T-Hg²⁺-T复合物的DNA分子B不能与单链DNA分子A通过碱基互补配对而结合。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述单链DNA分子B为序列表序列1所示的单链DNA分子。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述单链DNA分子A为序列表序列2和/或3所示的单链DNA分子。

4.根据权利要求1—3中任一所述的方法，其特征在于：所述标准溶液和所述待测溶液中的所述一末端经荧光素修饰的单链DNA分子B的浓度为10～50nmol/L。

5.根据权利要求1—4中任一所述的方法，其特征在于：所述反应的时间为2—10分钟。

6.根据权利要求1—5中任一所述的方法，其特征在于：所述标准溶液和所述待测溶液的溶剂为水。

7.根据权利要求1—6中任一所述的方法，其特征在于：在步骤1）后、步骤2）前，还包括将所述表面修饰了单链DNA分子A的倏逝波光纤传感探头甲上的与所述单链DNA分子A相结合的所述一末端经荧光素修饰的单链DNA分子B去除的步骤，获得所述探头乙；

所述去除具体可为用pH为1.9的5g/L的SDS溶液清洗所述探头甲的步骤。

8.根据权利要求1—7中任一所述的方法，其特征在于：所述表面修饰了单链DNA分子A的倏逝波光纤传感探头甲是按照包括如下步骤的方法得到的：

将所述倏逝波光纤传感探头表面硅烷化后，浸入含一末端经NH₂-(CH₂)_n-修饰的所述单链DNA分子A的溶液Ⅰ中，4℃反应；

所述倏逝波光纤传感探头侧壁的表面积与所述溶液Ⅰ中所述一末端经NH₂-(CH₂)_n-修饰的所述单链DNA分子A的浓度之比为41.4mm²:0.5μmol/L；

所述n为3—10。

9.一种检测Hg²⁺的试剂或试剂盒，其特征在于：含有序列表序列1所示的单链DNA分子，或含有一末端经荧光素修饰的序列表序列1所示的单链DNA分子。

10.根据权利要求9所述的试剂或试剂盒，其特征在于：含有序列表序列2和/或3所示的单链DNA分子,或含有一末端经NH₂-(CH₂)_n-修饰的序列表序列2和/或3所示的单链DNA分子，所述n为3—10。