[发明专利]用免疫层析技术检测蛋白的试纸条和方法

说明书

 

技术领域

本发明涉及纳米材料技术、免疫学技术、侧流层析技术等领域。更具体的，本发明涉及一种用免疫层析技术检测蛋白的试纸条；此外，本发明还涉及一种用免疫层析技术来检测蛋白的方法。

 

背景技术

研究发现很多疾病都有其蛋白标志物，疾病的有无、疾病的发展阶段或者疾病的疗效都可以通过监测其对应的蛋白标志物来了解，例如：心肌梗塞相关的蛋白标志物心肌脂肪酸结合蛋白（FABP）、心肌肌钙蛋白（cTnI）等，肾脏损伤相关的蛋白标志物尿白蛋白，糖尿病相关的蛋白糖化血红蛋白。另外，引起食物中毒的金黄色葡萄球菌也可以通过其肠毒素蛋白检测。不少对人类身体很重要的激素也是蛋白，如生长激素、绒毛膜促性腺激素（HCG）等。食物如肉类或奶中的生长激素过高被人体摄入后会导致青少年发育不正常，也需要加以检测，而尿液或血液中的绒毛膜促性腺激素监测是检测生育期妇女是否怀孕的常用简单方法。

目前检测这些蛋白标志物的的方法主要有酶联免疫分析法（ELISA）、化学发光免疫分析、时间分辨荧光免疫分析以及胶体金免疫层析法。其中ELISA、化学发光免疫分析、时间分辨荧光免疫分析都要用到昂贵的设备，需要专业技术人员在实验室中操作，而且操作步骤多，耗时长。胶体金免疫层析法则操作简单、方便、快速且便宜，但是其灵敏度较低，而且不能定量检测。因此有必要提供一种快速、方便、简单且高灵敏度的目标蛋白定量检测方法。

 

发明内容

本发明旨在解决本领域中的上述各种问题和实现以下目标。具体地，本发明的目的就是要提供一种方便、快速而且高灵敏度的地检测样品中的目标蛋白的试纸条和方法。

具体的，本发明提供了一种用免疫层析技术检测样品中的蛋白的试纸条。

在一种实施方式中，本发明提供了一种用免疫层析技术检测蛋白的试纸条，包括标记物垫和捕获膜，其特征在于，所述标记物垫含有光致发光微球标记的蛋白检测抗体，所述捕获膜含有蛋白捕获抗体。

在进一步的实施方式中，其特征在于，所述蛋白是绒毛膜促性腺激素。

在进一步的实施方式中，其特征在于，所述蛋白是尿白蛋白。

在进一步的实施方式中，其特征在于，所述蛋白是糖化血红蛋白。

在进一步的实施方式中，其特征在于，所述蛋白是生长激素。

在进一步的实施方式中，其特征在于，所述蛋白是金黄色葡萄球菌肠毒素。

在进一步的实施方式中，其特征在于，所述光致发光微球是荧光微球。

在进一步的实施方式中，其特征在于，所述荧光微球是时间分辨荧光微球。

在进一步的实施方式中，其特征在于，所述时间分辨荧光微球是含铕复合物的荧光微球。

在进一步的实施方式中，其特征在于，所述光致发光微球是磷光微球。

在进一步的实施方式中，其特征在于，所述磷光微球是含铂复合物的磷光微球。

在进一步的实施方式中，其特征在于，所述光致发光微球是二氧化硅微球。

在进一步的实施方式中，其特征在于，所述光致发光微球是聚苯乙烯微球。

在另一种实施方式中，本发明提供了一种用免疫层析技术检测蛋白的方法，其特征在于，在权利要求1所述的试纸条样品垫上滴加含待测蛋白的样品，反应后检测光信号。

详细说明

用免疫层析技术检测样品中目标蛋白的试纸条如图1示，包括样品垫1，标记物垫2，NC膜3，吸水纸4，塑料底板5。NC膜3上含有C线6和T线7。

其中样品垫一般为玻璃纤维、滤纸或滤血膜。标记物垫可为玻璃纤维、滤纸或聚酯膜。当样品垫和标记物垫材质相同时可整合在一起，用一条玻璃纤维、滤纸或聚酯膜来完成样品垫和标记物垫的功能。

所述标记物垫上或者含有光致发光微球标记的蛋白检测抗体，或者同时含有光致发光微球标记的蛋白检测抗体和生物素标记的目标蛋白捕获抗体，还可以含有其他用作阳性对照的光致发光微球标记的蛋白或抗体，如链亲和素或兔抗体。

捕获膜可以是硝酸纤维素膜（NC膜）、尼龙膜等，所述捕获膜的T线或者含有蛋白捕获抗体（双抗体夹心法），或者含链亲和素（标记物垫同时含光致发光微球标记的蛋白检测抗体和生物素标记的目标蛋白捕获抗体），或者含有目标蛋白（双抗原竞争法），C线或者含有能识别蛋白检测抗体的二抗，或者含生物素标记的牛血清白蛋白或卵清蛋白（标记物垫含链亲和素），或者含羊抗兔抗体（标记物垫含兔抗体）。