[发明专利]饲料添加剂用抗病毒组合物、冻干粉、制备方法及应用

权利要求书

1.饲料添加剂用抗病毒组合物，其特征在于：由以下重量份的组分组成：抗病毒卵黄抗体90～100份，抗病毒转移因子1～2份。

2.根据权利要求1所述的饲料添加剂用抗病毒组合物，其特征在于：所述的抗病毒卵黄抗体为抗犬瘟热卵黄抗体，所述的抗病毒转移因子为抗犬瘟热转移因子。

3.饲料添加剂用抗病毒冻干粉，其特征在于：由以下重量份的组分组成：抗病毒卵黄抗体95～97份，抗病毒转移因子1～2份，灭活剂0.2～0.3份，防腐剂0.01～0.02份，耐热冻干保护剂2.05～3.6份。

4.根据权利要求3所述的饲料添加剂用抗病毒冻干粉，其特征在于：所述的抗病毒卵黄抗体为抗犬瘟热卵黄抗体，所述的抗病毒转移因子为抗犬瘟热转移因子。

5.根据权利要求3所述的饲料添加剂用抗病毒冻干粉，其特征在于：所述的耐热冻干保护剂由以下重量份的组分组成：硒0.05～0.1份，维生素C0.5～1份，聚乙烯吡咯烷酮1～2份，甘氨酸0.5份。

6.一种如权利要求3-5任一项所述的饲料添加剂用抗病毒冻干粉的制备方法，其特征在于：具体步骤如下：

（1）分离毒株制备疫苗：取病毒株增殖、灭活后制得疫苗备用；

（2）免疫健康鸡群制备高免蛋：取步骤（1）制备的疫苗免疫接种健康鸡群，当抗体效价达到1:256时，收集高免蛋清理、消毒后晾干备用；

（3）酸化处理：取步骤（2）制备的高免蛋分离卵黄，加入等体积的无菌水，充分搅拌至颜色发白得卵黄溶液，在卵黄溶液中加入pH值为4.9～5.2的酸化水，加入量为卵黄溶液体积的8倍，混匀后静置沉淀；

（4）取步骤（3）静置后的上清液，按体积加入0.8%的NaCl和NaSO₄混合物，以提高抗体的解离度，离心得含有抗病毒卵黄抗体的上清液；

（5）取步骤（4）中的上清液，上清液中抗病毒卵黄抗体的量为95～97份，再在上清液中加入1～2份的抗病毒转移因子，混匀后依次用0.45μm和0.22μm的滤膜过滤；

（6）将步骤（5）的滤液浓缩得浓缩液，在浓缩液中依次加入0.2～0.3份的灭活剂、0.01～0.02份的防腐剂及2.05～3.6份的耐热冻干保护剂，混匀后经预冻、冻干处理即得抗病毒冻干粉。

7.根据权利要求6所述的饲料添加剂用抗病毒冻干粉的制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中第一次使用灭活疫苗正常量，为10^4.2ELD₅₀/0.1ml灭活疫苗1.5mL，间隔7天免疫1次，后续每次免疫增加1倍量，于第二次免疫后开始检测抗体效价。

8.根据权利要求6所述的饲料添加剂用抗病毒冻干粉的制备方法，其特征在于：所述步骤（4）中NaCl与NaSO₄的质量比为4:1。

9.根据权利要求6所述的饲料添加剂用抗病毒冻干粉的制备方法，其特征在于：所述步骤（5）中的抗病毒转移因子采用以下方法制备得到：

（1）用灭菌后的生理盐水清洗用病毒抗原免疫过的猪脾脏，去其表面筋、脂肪等组织，再用生理盐水冲洗；

（2）将步骤（1）处理后的猪脾脏破碎，加入2倍预冷的PBS缓冲液，用组织匀浆仪将其匀质得匀浆液；

（3）在将步骤（2）中的匀浆液用超声破碎仪处理10min得破碎液；

（4）将步骤（3）的破碎液调至pH值为5.3～5.7，6000rpm离心30min，收集上清液；

（5）将步骤（4）的上清液用微滤膜过滤，截留分子量7000道尔顿的物质，收集上清液；

（6）将步骤（5）的上清液用除菌滤膜过滤，得到抗病毒转移因子原液，4℃保存或冻干备用。

10.一种如权利要求3-5任一项所述的饲料添加剂用抗病毒冻干粉在制备饲料中的应用，其特征在于：步骤如下：取饲料添加剂用抗病毒冻干粉，按照重量百分比为0.2～0.6%加入饲料中，混匀即得。