[发明专利]一种金边胡颓子的组织培养方法

权利要求书

1.一种金边胡颓子的组织培养方法，包括以下步骤：

步骤1：外植体的选择及消毒，选取成年金边胡颓子顶部剪取着生叶芽的一年生枝条，采下的枝条进行水插，置于生长室中，促使叶芽萌发为嫩梢，在嫩梢长2～4厘米时切下作外植体，或者在4～5月份在同株树上取相同长的当年嫩梢直接作外植体；采下枝条后，先用70％酒精泡30秒，接着在5％的次氯酸钙溶液中泡5分钟，无菌水冲洗3-4次，然后将其切成长5毫米的节段，作为初代外植体；

步骤2：接种培养 

a、初代培养，将所备外植体接种在MS + KT0.5mg∕L+ZT1.0mg∕L+NAA0.2mg∕L+蔗糖30g/L +琼脂6g/L，PH为5.5～5.6的培养基上，在温度25±2℃室温下，光照强度2500lux的条件下，培养25-30天时，增殖芽长到2-3cm；

b、 继代培养， 把切下丛生芽接种在MS + BA1.5mg∕L+ZT1mg∕L+NAA0.3mg∕L+蔗糖30g/L +琼脂6g/L，PH为5.5～5.6的培养基上，在温度25±2℃，，每日光照14小时，至28±2天，小芽基部形成愈伤组织，并形成丛生芽，丛生小芽达到1-2cm；

c、 生根培养，当增殖芽长至2～3㎝时，将增殖芽的基部在1克/升的含IBA溶液中浸泡15分钟，转移到生根培养基上培养，接种后将其黑暗条处理12天，温度控制在25～28℃；暗处理后在光照强度为1200lux，每日光照14小时条件下培养；经25天，当可见白色短根形成，即进行炼苗及移栽。

2.根据权利要求1所述金边胡颓子的组织培养方法，其特征在于：步骤2中所述生根培养的生根培养基为1∕2MS+活性碳1.0g∕L+蔗糖20g∕L。

3.根据权利要求2所述金边胡颓子的组织培养方法，其特征在于：步骤所述炼苗及移栽的具体方法为：当试管苗长出根但尚未老化前，打开瓶盖放在阳光充足处让其锻炼1～2天，然后取出幼苗用温水将琼脂洗掉，移栽到消毒过的基质中；移栽时要注意不要伤根并使其处于伸展状态，浇透水后，用塑料薄膜覆盖，保持空气的相对湿度在90％以上，温度在25℃±5℃，过一星期后逐步通气并浇灌适量的水。