[发明专利]一种抗鸭瘟组合物、冻干粉、制备方法及应用有效
| 申请号: | 201310312910.9 | 申请日: | 2013-07-24 |
| 公开(公告)号: | CN104162156A | 公开(公告)日: | 2014-11-26 |
| 发明(设计)人: | 吴红云;赵小中;郭俊清 | 申请(专利权)人: | 河南联合英伟饲料有限公司 |
| 主分类号: | A61K39/42 | 分类号: | A61K39/42;A61K9/19;A61P31/22;A23K1/16;A23K1/18;A61K35/28 |
| 代理公司: | 郑州睿信知识产权代理有限公司 41119 | 代理人: | 牛爱周 |
| 地址: | 451162 *** | 国省代码: | 河南;41 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 抗鸭瘟 组合 干粉 制备 方法 应用 | ||
技术领域
本发明具体涉及一种饲料添加剂用抗鸭瘟组合物,以及抗鸭瘟冻干粉,同时还涉及该冻干粉的制备方法及应用,属于兽用饲料添加剂技术领域。
背景技术
鸭瘟(Duck plape)又名鸭病毒性肠炎(Duck virus enteritis,DVE),是鸭、鹅和其他雁形目禽类的一种急性、热性、败血性传染病。该病的特征是流行广泛,传播迅速,发病率和死亡率都高。早在1923年Baudet氏在荷兰首次发现本病,直到1940年Bos氏首次提出鸭瘟的名称,并确认是一种不同于鸡瘟的新病毒病。以后在欧、美各国均有本病发生的报道。鸭瘟在我国流行的正式报道是黄引贤1957年在广东首先提出的,随后武汉、上海、浙江、江苏、广西、湖南和福建等地陆续发现,至80年代传播到东北各省。1957年以来,本病广泛流行于我国华南、华中、华东养鸭业较发达地区,造成很大的经济损失。
1963年全国农业科学规划会议将防制鸭瘟作为重点课题,其后许多单位进行了大量的防治研究工作,并成功地研制了各类预防用疫苗,从而有效地控制了本病的发生和流行,有力地保障了养鸭业的发展。然而,人们通过疫苗类对鸭瘟进行免疫,早期效果较好,但是需要多次接种,操作麻烦,成本较高,容易使畜禽产生应激反应,且疫苗对于保藏条件要求较为苛刻,需在低温下冷藏,室温条件下一段时间则失效。因此,迫切需要一种能够防治鸭瘟的产品。
发明内容
本发明的目的是提供一种抗鸭瘟组合物。
同时,本发明还提供一种抗鸭瘟冻干粉。
再者,本发明还提供一种抗鸭瘟冻干粉的制备方法。
最后,本发明提供一种抗鸭瘟冻干粉在制备饲料中的应用。
为了实现以上目的,本发明所采用的技术方案是:
一种抗鸭瘟组合物,由以下重量份的组分组成:抗鸭瘟卵黄抗体90~100份,抗鸭瘟转移因子0.5~2份。
一种抗鸭瘟冻干粉,由以下重量份的组分组成:抗鸭瘟卵黄抗体95~97份,抗鸭瘟转移因子1~2份,灭活剂0.2~0.3份,防腐剂0.01~0.02份,耐热冻干保护剂2.05~3.6份。
所述的灭活剂为甲醛。
所述的防腐剂为硫柳汞。
优选的,所述的耐热冻干保护剂由以下重量份的组分组成:硒0.05~0.1份,维生素C0.5~1份,聚乙烯吡咯烷酮1~2份,甘氨酸0.5份。
一种抗鸭瘟冻干粉的制备方法,具体步骤如下:
(1)分离毒株制备疫苗:取鸭瘟病毒株增殖、灭活后制得疫苗备用;
(2)免疫健康鸡群制备高免蛋:取步骤(1)制备的疫苗免疫接种健康鸡群,当抗体效价达到1:256时,收集高免蛋清理、消毒后晾干备用;
(3)酸化处理:取步骤(2)制备的高免蛋分离卵黄,加入等体积的无菌水,充分搅拌至颜色发白得卵黄溶液,在卵黄溶液中加入pH值为4.9~5.2的预冷酸化水,加入量为卵黄溶液体积的8倍,混匀后室温下静置沉淀;
(4)取步骤(3)静置后的上清液,按体积加入0.8%的NaCl和NaSO4混合物,以提高抗体的解离度,离心得含有抗鸭瘟卵黄抗体的上清液;
(5)取步骤(4)中的上清液,上清液中抗鸭瘟卵黄抗体的量为95~97份,再在上清液中加入1~2份的抗鸭瘟转移因子,混匀后依次用0.45μm和0.22μm的滤膜过滤;
(6)将步骤(5)的滤液浓缩得浓缩液,在浓缩液中依次加入0.2~0.3份的灭活剂、0.01~0.02份的防腐剂及2.05~3.6份的耐热冻干保护剂,混匀后经预冻、冻干处理即得抗鸭瘟冻干粉。
所述步骤(2)中第一次使用灭活疫苗正常量,为103.2ELD50/0.1ml鸭瘟病毒灭活疫苗1.5mL,间隔7天免疫1次,后续每次免疫增加1倍量,于第二次免疫后开始检测抗体效价。
所述步骤(4)中NaCl与NaSO4的质量比为4:1。
所述步骤(5)中的抗鸭瘟转移因子可以为市售商品,也可以采用以下方法制备得到:
(1)用灭菌后的生理盐水清洗用鸭瘟病毒抗原免疫过的猪脾脏,去其表面筋、脂肪等组织,再用生理盐水冲洗;
(2)将步骤(1)处理后的猪脾脏破碎,加入2倍预冷的PBS缓冲液,用组织匀浆仪将其匀质得匀浆液;
(3)在将步骤(2)中的匀浆液用超声破碎仪处理10min得破碎液;
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