[发明专利]一种利用磷霉素选育达托霉素高产菌株的方法无效
| 申请号： | 201310311308.3 | 申请日： | 2013-07-23 |
| 公开（公告）号： | CN104342379A | 公开（公告）日： | 2015-02-11 |
| 发明（设计）人： | 沈依群;张晓来;陆茂林;钱国芬;许春燕;司竑飞;杨晓伟 | 申请（专利权）人： | 江苏省微生物研究所有限责任公司 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12N13/00;C12R1/465 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 214063*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 利用 磷霉素 选育 霉素 高产 菌株 方法 | ||
1.一种利用磷霉素选育达托霉素高产菌株的方法，其特征在于包括以下过程：将玫瑰孢链霉菌(Streptomyces roseosporus)亲株的斜面孢子用无菌水制成105-107个孢子/ml的单孢子悬液，将1-3ml的孢子悬液分装于玻璃皿中，于15瓦紫外灯下处理0.5-1.5分钟，然后将辐射处理的孢子悬液用无菌水稀释到10-3-10-5后，涂布于培养平板中26-28℃培养7-8天，用无菌竹签将长出的菌落挑出接种于含有200-1000μg/ml的磷霉素的筛选平板上，挑取对相应浓度磷霉素敏感的菌落，于斜面培养基培养6-7天后，接种于装有30ml液体发酵培养基的250ml摇瓶，于28-30℃，转速为200-220rpm的摇床中培养120-160h，通过HPLC，检测达托霉素产量，从而获得高产的达托霉素产生菌。
2.按权利要求1所述的方法，其特征在于，筛选培养基组成及质量含量为：酵母粉2-5g，麦芽浸出粉8-12g，葡萄糖3-5g，磷霉素0.2-1g，琼脂18-22g，去离子水1L，PH自然。
3.按权利要求1及2所述的方法，其特征在于，筛选平板中磷霉素的含量为：200μg/ml或400μg/ml或600μg/ml或800μg/ml或1000μg/ml。
4.按权利要去1所述的方法，其特征在于，液体发酵培养基组成及质量含量为：可溶性淀粉6-10g，酵母粉4-6g，糊精10-20g，干酪素3-5g，胰蛋白胨4-10g，K2SO43-5g，L-天冬酰胺1-3g，溶于1L自来水中，PH7.5。
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