[发明专利]一种草莓高效脱毒组培方法无效
申请号: | 201310306769.1 | 申请日: | 2013-07-19 |
公开(公告)号: | CN103348918A | 公开(公告)日: | 2013-10-16 |
发明(设计)人: | 高峰英纪 | 申请(专利权)人: | 合肥瑞谷农业科技有限公司 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 北京双收知识产权代理有限公司 11241 | 代理人: | 王菊珍 |
地址: | 230031 安徽省合肥市*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 草莓 高效 脱毒 方法 | ||
1.一种草莓高效脱毒组培方法,其特征在于:以草莓匍匐茎顶端的微茎尖为外植体进行组织培养,得到草莓植株。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述草莓匍匐茎顶端的微茎尖是将包裹在茎尖分生组织外侧的叶片去除,得到的不带叶原基的微茎尖。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述方法包括以下步骤:
(1)将所述外植体置于诱导微茎尖萌发培养基上培养,诱导微茎尖萌发,得到萌发的幼苗;
(2)将幼苗接到增殖培养基上培养,增殖出丛生芽;
(3)将上述步骤(2)得到的丛生芽转接到生根培养基上培养,诱导生根,得到完整再生植株。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:步骤(1)中,所述诱导微茎尖萌发培养基是在MS基本培养液中添加6-BA、NAA、碳源和凝胶剂得到的半固体培养基;其中6-BA的终浓度是0.1-2.0mg/L,NAA的终浓度是0.01-0.1mg/L;其中6-BA的终浓度优选是0.3mg/L,NAA的终浓度优选是0.01mg/L。
5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:步骤(2)中,所述增殖培养基是在MS基本培养液中添加6-BA、NAA、碳源和凝胶剂得到的半固体培养基;其中6-BA的终浓度是0.1-2.0mg/L,NAA的终浓度是0.01-0.1mg/L;其中6-BA的终浓度优选是0.5mg/L,NAA的终浓度优选是0.03mg/L。
6.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:步骤(3)中,所述生根培养基是在1/2MS基本培养液中添加IBA、碳源和凝胶剂得到的半固体培养基;其中IBA的终浓度是0.02mg/L。
7.根据权利要求3-6任一项所述的方法,其特征在于:所述步骤(1)的培养时间是20天,步骤(2)的培养时间是30天,步骤(3)的培养时间是30天。
8.根据权利要求3-6任一项所述的方法,其特征在于:所述各步骤中的培养条件为:培养温度:25±2℃;采用LED光源在培养过程中进行光照,光照时间:12-16h/d;光强:2000-3000LX。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于:所述LED光源采用红、蓝、白光的混合光照,其中红、蓝、白光之间的比例为:5-7:1-3:8-10;优选比例为:7:2:10。
10.根据权利要求3-9任一项所述的方法,其特征在于:所述各步骤的培养基中的凝胶剂是琼脂、卡拉胶或Gelrite,优选为琼脂,在培养基中的终浓度为7-8g/L;碳源是葡萄糖、麦芽糖或蔗糖,优选为蔗糖,在培养基中的终浓度为30g/L。
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