[发明专利]重金属胁迫下黄孢原毛平革菌活细胞生物量的检测方法

权利要求书

1.一种重金属胁迫下黄孢原毛平革菌活细胞生物量的检测方法，包括以下步骤：

（1）菌球培养：将黄孢原毛平革菌加入液态培养基中进行恒温培养，然后向含黄孢原毛平革菌的液态培养基中加入重金属溶液进行胁迫处理，经过滤洗涤后，得到重金属胁迫后的黄孢原毛平革菌菌球；

（2）显色反应：取上述重金属胁迫后的黄孢原毛平革菌菌球加入到无菌噻唑蓝溶液中，于30℃～50℃下进行显色反应0.5h～4h，然后迅速加入盐酸溶液终止反应，得到反应后的混合液；

（3）离心处理：将上述混合液进行离心处理，去除上清液，得到下层沉淀物；

（4）萃取检测：向上述沉淀物中加入萃取剂进行萃取，得到萃取液，测定萃取液的吸光度，计算重金属胁迫下黄孢原毛平革菌的活细胞生物量。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤（1）中将黄孢原毛平革菌培养至生长对数期，培养温度为30℃～39℃。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤（1）中所述胁迫处理的时间为2h～48h，所述胁迫处理的温度为30℃～39℃。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤（1）中所述重金属溶液为含镉、铅、铜、铬中一种或几种的重金属溶液；当重金属溶液为含镉溶液时，重金属溶液中镉离子的浓度为1μmol/L～500μmol/L。

5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤（2）中所述无菌噻唑蓝溶液的浓度为1g/L～5g/L，所述盐酸溶液的浓度为0.2mol/L～1mol/L。

6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤（3）中所述离心的转速为8000rpm～10000rpm，离心的时间为2min～10min。

7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤（4）中所述萃取剂包括二甲基亚砜、甲醇、丙酮或异丙醇。

8.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤（4）中所述萃取的时间为2h～4h。

9.根据权利要求1～8中任一项所述的检测方法，其特征在于，步骤（1）～步骤（3）中，所需用器皿均需灭菌处理，所用试剂溶液均用无菌液配置。