[发明专利]一种广谱抗菌多肽的制备方法有效
申请号: | 201310296766.4 | 申请日: | 2013-07-16 |
公开(公告)号: | CN103360467A | 公开(公告)日: | 2013-10-23 |
发明(设计)人: | 卢永忠;庄玉;刘杰 | 申请(专利权)人: | 青岛科技大学 |
主分类号: | C07K7/08 | 分类号: | C07K7/08;A61P31/04 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 266101 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 广谱 抗菌 多肽 制备 方法 | ||
1.一种广谱抗菌多肽的制备方法,其特征在于,步骤包括:
一、预测筛选:下载海鞘的基因组序列,寻找其中具有潜在编码功能的小开放阅读框,将这些小开放阅读框分别翻译出对应的氨基酸序列,从中筛选抗菌肽;
二、制备抗菌肽:根据步骤一中预测筛选的抗菌肽序列,利用固相合成法合成其中的部分多肽,并且使C端酰胺化,N端不含有蛋氨酸,制备抗菌肽,并进行质谱鉴定;
三、抗菌性检测:将抗菌肽用蒸馏水溶解成浓度为1mg/ml,采用琼脂糖扩散法进行抗菌活性检测;
四、溶血性检测:利用羊血红细胞检测抗菌肽的溶血作用;
五、制备广谱抗菌多肽:最终筛选到的具有广谱抗菌功能的多肽。
2.根据权利要求1所述的广谱抗菌多肽的制备方法,其特征在于: 所述步骤五中制备的多肽,其序列为:Phe Ser Leu Phe Phe Pro Tyr Ala Ala Leu Lys Trp Leu Arg Lys Leu Leu Lys Lys。
3.根据权利要求1所述的广谱抗菌多肽的制备方法,其特征在于: 所述步骤三中琼脂糖扩散法中使用的菌株为大肠杆菌、金黄葡萄球菌、四联球菌、白色假丝酵母、变形杆菌、绿脓杆菌、变异链球菌、幽门螺杆菌的一种或几种组合。
4.根据权利要求1所述的广谱抗菌多肽的制备方法,其特征在于: 所述步骤五中制备的多肽对变异链球菌、幽门螺杆菌具杀伤作用。
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