[发明专利]拟南芥中的蛋白AtbHLH122及其编码基因在调控植物耐逆性中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及拟南芥中的蛋白AtbHLH122及其编码基因在调控植物耐逆性中的应用。

背景技术

干旱和盐胁迫是当今限制作物产量的主要环境因素。在长期进化过程中，植物形成了各种各样的机制来应对环境变化和各种胁迫，包括形态、生理和生化等方面的改变。随着生物技术的发展，植物适应环境胁迫的分子机制得到广泛的关注和研究，逆境响应基因的差异表达在植物抗逆中起着重要的作用。逆境响应基因根据其功能大体上可以分成两大类群：第一类主要包括一些可溶性的酶类，LEA(the Late Embryogenesis Abundant Proteins)蛋白，水通道蛋白，分子伴侣和用于维持细胞完整性的酶类，保持离子平衡和消除过氧化物的物质和酶类。第二类物质主要包括蛋白激酶，参与信号感知和转导、调节基因表达活性的转录因子。

bHLH是真核生物中广泛存在的、家族成员最多的一大类转录因子。自bHLH发现以来，越来越多的研究表明该类转录因子参与真核生物众多的生理及发育进程。在酵母等单细胞真核生物中，bHLH参与染色体的分离、新陈代谢调节等生理生化过程，在动物体中，bHLH主要在感知外界环境、调节细胞周期、组织分化等过程中发挥重要作用。由于植物bHLH家族成员众多、参与的生物过程复杂，对于其了解还不是十分清楚。

发明内容

本发明的一个目的是提拟南芥蛋白bHLH122的新用途，该蛋白质的氨基酸序列如序列表序列1所示，所述新用途为序列表序列1所示蛋白可用于调控植物的耐逆性，或调节序列表序列1所示蛋白表达量的物质或方法可用于调控植物的耐逆性。

本发明的另一个目的是提供一种提高植物耐逆性的方法，包括在所述植物中导入序列表序列1所示蛋白编码基因的步骤。

本发明还提供一种培育转基因植物的方法，包括将序列表序列1所示蛋白编码基因导入所述植物中，获得耐逆性高于所述导入前的所述植物的转基因植物。

在上述方法中，序列表序列1所示蛋白编码基因为如下1）-5）基因中的任意一种：

1）其核苷酸序列是序列表序列2的第141位至第1625位所示的DNA分子；

2）其核苷酸序列是序列表序列2的第141位至第1280位所示的DNA分子；

3）其核苷酸序列是序列表序列2所示的DNA分子；

4）与1）或2）或3）限定的DNA序列至少具有70%、至少具有75%、至少具有80%、至少具有85%、至少具有90%、至少具有95%、至少具有96%、至少具有97%、至少具有98%或至少具有99%同源性且编码序列表序列1所述蛋白质的DNA分子；

5）在严格条件下与1）或2）或3）或4）限定的DNA序列杂交且编码序列表序列1所述蛋白质的DNA分子。

所述严格条件可为如下：50℃，在7％十二烷基硫酸钠（SDS）、0.5M Na₃PO₄和1mM EDTA的混合溶液中杂交，在50℃，2×SSC，0.1%SDS中漂洗；还可为：50℃，在7％SDS、0.5M Na₃PO₄和1mM EDTA的混合溶液中杂交，在50℃，1×SSC，0.1%SDS中漂洗；还可为：50℃，在7％SDS、0.5M Na₃PO₄和1mM EDTA的混合溶液中杂交，在50℃，0.5×SSC，0.1%SDS中漂洗；还可为：50℃，在7％SDS、0.5M Na₃PO₄和1mM EDTA的混合溶液中杂交，在50℃，0.1×SSC，0.1%SDS中漂洗；还可为：50℃，在7％SDS、0.5M Na₃PO₄和1mM EDTA的混合溶液中杂交，在65℃，0.1×SSC，0.1%SDS中漂洗；也可为：在6×SSC，0.5%SDS的溶液中，在65℃下杂交，然后用2×SSC，0.1%SDS和1×SSC，0.1%SDS各洗膜一次。

在上述方法，所述导入具体可通过重组载体pMDC32-AtbHLH122实现，所述重组载体pMDC32-AtbHLH122是将载体pMDC32的致死基因ccdB替换为序列表序列2的第141—1625位所示的DNA片段。

在上述应用或方法，所述植物可为双子叶植物或单子叶植物，所述双子叶植物具体可为拟南芥。

在上述应用或方法，所述耐逆性为耐旱性、耐盐性和耐渗透胁迫三种性状中的至少一种。