[发明专利]甘薯软腐病抗性鉴定方法无效
| 申请号: | 201310285482.5 | 申请日: | 2013-07-08 |
| 公开(公告)号: | CN103333944A | 公开(公告)日: | 2013-10-02 |
| 发明(设计)人: | 杨冬静;谢逸萍;孙厚俊;赵永强;徐振;张成玲;王波 | 申请(专利权)人: | 江苏徐州甘薯研究中心 |
| 主分类号: | C12Q1/18 | 分类号: | C12Q1/18;C12R1/845 |
| 代理公司: | 徐州市三联专利事务所 32220 | 代理人: | 周爱芳 |
| 地址: | 221121 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 甘薯 软腐 抗性 鉴定 方法 | ||
1.一种甘薯软腐病抗性鉴定方法,其特征是:每个品种取3块中等大小的薯块,经严格消毒晾干后,切薯块中部薯片,每薯块切3个薯片,每薯片厚度为8mm,置于放有灭菌湿润滤纸保湿的灭菌培养皿中,接种1块6mm的甘薯软腐病菌菌碟于薯片中央,将接种好的薯片置于26℃生化培养箱中培养,期间加无菌水保湿一次;21小时后将鉴定材料取出,量取薯片发病直径,分别计算防效,以平均防效进行分级,评价品种的抗感特性;具体按如下步骤进行:
(1)病原菌分离和准备:从中国农科院甘薯研究所甘薯库中取带软腐病薯块,按常规消毒,再用无菌刀将病健交接处的组织切成薄片移到PDA培养基上培养,经分离纯化,并经柯赫氏法则验证确定;于26℃下在PDA平板上培养,获病原菌纯培养;在活化1天后的软腐病菌平板中打取6mm菌碟,将菌碟置于PDA培养基平板中央,26℃生化培养箱中培养1天,将培养好的软腐病菌平板打取菌碟;
(2)平板消毒保湿:将灭菌后的滤纸置于培养皿中,喷无菌水至滤纸湿润后备用;
(3)参试品种准备:选14个甘薯品种,每品种准备三块薯块,大小为50mm≤薯块中部直径≤70mm,清洗晾干后用质量浓度75%的酒精消毒,消毒后切薯块中部薯片,厚度为8mm,每薯块切3个薯片,用高感软腐病品种烟25做对照;将切好的薯片分别置于保湿好的消毒平板中;
(4)接种鉴定:每个薯片中央接种1个菌碟,接种后的平板置于26℃生化培养箱中培养,期间加无菌水保湿一次使底部滤纸湿润即可;
(5)调查评价:接种21小时后将平板取出,量取薯片横切面上薯片发病的直径,按分级标准进行分级并计算病情指数,根据病情指数进行品种的抗感特性评价,甘薯品种软腐病病抗性水平按照以下标准进行确定:
高抗病情指数≤20;
抗病20<病情指数≤40;
中抗40<病情指数≤60;
感病60<病情指数≤80;
高感80<病情指数。
2.根据权利要求1所述的甘薯软腐病抗性鉴定方法,其特征是:所述的分级标准 是:
0级:薯片正常无任何病症;
1级:薯片病斑直径≤10mm;
2级:10mm<薯片病斑直径≤20mm;
3级:20mm<薯片病斑直径≤30mm;
4级:薯片病斑直径>30mm。
3.根据权利要求1所述的甘薯软腐病抗性鉴定方法,其特征是:所述的病情指数计算公式为:
。
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