[发明专利]鹿产品中维生素E的分析检测方法

说明书

技术领域

本发明属于来源于动物的药物中有效成分的分析方法的技术范围。具体涉及在含有鹿产品中维生素E成分的分析检测。

背景技术

维生素E（Vitamin E）是一种脂溶性维生素，又称生育酚，是最主要的抗氧化剂之一。溶于脂肪和乙醇等有机溶剂中，不溶于水，对热、酸稳定，对碱不稳定，对氧敏感，对热不敏感。生育酚能促进性激素分泌，使男子精子活力和数量增加；使女子雌性激素浓度增高，提高生育能力，预防流产，还可用于防治男性不育症、烧伤、冻伤、毛细血管出血、更年期综合症、美容等方面。近来还发现维生素E可抑制眼睛晶状体内的过氧化脂反应，使末稍血管扩张，改善血液循环，预防近视发生和发展等。

维生素E主要有四种衍生物，按甲基位置分为α、β、γ和δ四种。不同构型的维生素E，其活性也不相同。其中活性最高的是α构型，其次为β构型，γ和δ构型活性要低得多。

维生素E含量的测定，一般采用高效液相色谱法，但通常不能分离不同的构型。鹿产品中维生素E含量较高，但目前尚无鹿产品中维生素E含量的分析检测方法，特别是其中4种构型的分析检测方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种对鹿产品（鹿茸、鹿胎、鹿角帽、公鹿血、母鹿血及其混合物）中，将α、γ（和β）、δ构型维生素E含量同时检测的快速、准确的分析方法。其中γ和β两种构型分不开，所以检测结果为两种构型的合量。

为达到本发明的目的所采用的技术方案：用高效液相色谱法建立三种构型维生素E含量的方法，具体为采用高效液相色谱法在同一波长下，同时测定鹿中药材中三种构型维生素E含量，具体的色谱峰出峰顺序为：α构型为8.8±0.2min、γ（和β）为9.9±0.2min、δ为11.1±0.2min。其中γ和β两种构型分不开，两者出峰时间、峰形和峰面积都是一样的，所以检测结果为两种构型的合量。

通过考察不同的实验参数，最终确立了最佳的色谱条件，在样品的测定中得到了基线平稳、分离效果好、色谱峰形好的色谱图。

具体包括如下步骤：

（1）将鹿产品干燥，粉碎，过100目筛，按每0.2～0.5g的鹿产品加入1mL正己烷，用甲醇定容至10mL的比例配制混合液，超声波破碎3min，过滤得滤液；

（2）取步骤（1）所得滤液用ODS5μm色谱柱分析，以100%甲醇为流动相，柱温为30℃，流速为0.8mL/min，进样量为20μL；

（3）对步骤（2）的柱流出液，采用二极管阵列检测器检测，检测波长为204nm，色谱峰出峰时间为：α构型为8.8±0.2min、γ（和β）构型为9.9±0.2min、δ构型为11.1±0.2min；

（4）以峰面积计算各种构型维生素E的含量。

对于上述技术方案中，优选的情况下，所述鹿产品为鹿茸、鹿胎、鹿角帽和鹿鲜血中的一种。

对于上述技术方案中，优选的情况下，所述鹿鲜血先经过冷冻干燥预处理。其中，所述鹿鲜血为公鹿血、母鹿血或其混合物。

对于上述技术方案中，优选的情况下，所述鹿茸、鹿胎、鹿角帽分别在80℃下进行干燥至恒重，此为预处理步骤。

对于上述技术方案中，优选的情况下，所述ODS5μm色谱柱的规格为4.6mm×25cm。

对于上述技术方案中，优选的情况下，所述步骤（1）中，鹿茸、鹿胎、鹿角帽称取的质量为0.2g；鹿血干粉称取的质量为0.5g。

本发明的方法，其准确度以加标回收率试验测得，其回收率分别是：α构型95.30～98.66%，γ（和β）构型95.68～100.03%，δ构型97.44～98.82%。其稳定性RSD（相对标准偏差）分别为：α构型1.23，γ（和β）构型5.51，δ构,4.47。其最小检出限分别为：α构型为0.00431mg/L，γ（和β)构型为0.00269mg/L，δ构型为0.00510mg/L。其精密度，在测定次数n=3，X±RSD中的RSD值均在±0.016～0.050间。

本发明突出的特点是能够快速、准确地同时测定鹿产品中三种不同构型的维生素E的含量。

附图说明

图1：标准样品和样品溶剂的色谱图。其中：横纵坐标分别代表保留时间和色谱峰强度，从图中可以看出，在2.1～7.0min有一系列的溶剂色谱峰；