[发明专利]一种柠檬酸的生产方法

权利要求书

1.一种生产柠檬酸的方法，其特征在于：包括如下步骤：

a、在发酵罐中加入发酵培养基，所述发酵培养基包括以下重量份的物质：葡萄糖母液7-20%、大豆蛋白水解物5-30‰、MnSO₄  2-4‰、(NH)₂SO₄ 1-10%、余量为水；

b、在上述发酵培养基中接入发酵种子培养基，进行发酵培养得到柠檬酸。

2.根据权利要求1所述的一种生产柠檬酸的方法，其特征在于：步骤b中接入的发酵种子培养基的体积占发酵培养基总体积的10%-20%，发酵温度为34-38℃，发酵周期为70小时，发酵罐内单位体积的溶氧量为20-30%。

3.根据权利要求1所述的一种生产柠檬酸的方法，其特征在于：所述发酵种子培养基的培养步骤如下：

（1）、制备种子培养基；

（2）、黑曲霉单菌落培养，通过在平板种子培养基上进行划线培养出黑曲霉单菌；

（3）、黑曲霉单菌落活化，挑取单菌落接种到活化培养基中进行活化；

（4）、将活化后的黑曲霉接种到斜面种子培养基进行种子的传代；

（5）、待菌种培养好以后，用接种环刮取菌种，刮取菌种1-10环到灭菌后的纯水内，然后将含有菌种的水倒入步骤（1）中制备好的种子培养基内；

（6）、将步骤（5）中含有黑曲霉菌种的种子培养基倒入发酵罐中进行发酵得到发酵种子培养基。

4.根据权利要求3所述的一种生产柠檬酸的方法，其特征在于：发酵

种子培养基的培养步骤（1）中所述的种子培养基主要成分的重量百分含量如下：

葡萄糖母液：7-20%；

大豆蛋白水解物：0.45-9‰；

MnSO₄：2-4‰；

MgSO₄：1-2‰；

余量为水。

5.根据权利要求3所述的一种生产柠檬酸的方法，其特征在于：发酵种

子培养基的培养步骤（2）中所述的平板种子培养基主要成分的重量百分含量如下：

麦芽汁：10-30%；

大豆蛋白水解物：5-30‰；

(NH₄)₂SO₄：1-10%；

琼脂：10-25%；

余量为水。

6.根据权利要求5所述的一种生产柠檬酸的方法，其特征在于：所述平

板种子培养基的pH控制在7.5，培养温度控制在30℃-40℃，培养时间为3-10天。

7.根据权利要求3所述的一种生产柠檬酸的方法，其特征在于：所述发酵种子培养基的培养步骤（3）中所述的活化培养基主要成分的重量百分含量如下：

麦芽汁：10-30%；

MnSO₄：2-4‰；

(NH₄)₂SO₄：1-10%；

余量为水。

8.根据权利要求7所述的一种生产柠檬酸的方法，其特征在于：所述活化培养基的pH控制在7.5，培养温度控制在30℃-40℃，控制培养时间3-10天。

9.根据权利要求3所述的一种生产柠檬酸的方法，其特征在于：所述发酵种子培养基的培养步骤（4）中所述的斜面种子培养基主要成分的重量百分含量如下：

麦芽汁：10-30%；

(NH₄)₂SO₄：1-10%；

FeCl₂：0.01-0.1‰；

琼脂：10-25%；

余量为水。

10.根据权利要求9所述的一种生产柠檬酸的方法，其特征在于：所述斜面种子培养基的pH控制为7.5，培养温度控制在30℃-40℃，控制培养时间3-10天。