[发明专利]一种植物根边缘细胞无菌培养装置与方法有效
申请号: | 201310272549.1 | 申请日: | 2013-06-28 |
公开(公告)号: | CN103333801A | 公开(公告)日: | 2013-10-02 |
发明(设计)人: | 彭程;施积炎;何俊昱;刘婷婷;宋婕 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12M3/00 | 分类号: | C12M3/00;C12N5/04;A61L2/10 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人: | 杜军 |
地址: | 310027 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 植物 边缘 细胞 无菌 培养 装置 方法 | ||
1.一种植物根边缘细胞无菌培养装置,其特征在于包括立方体柜、滑轮轨道、轨道处滑轮、抽屉隔板、开关门、开关门合页、磁碰、拉手、紫外灭菌灯、万向轮。
2.如权利要求1所述的植物根边缘细胞无菌培养装置,其特征在于所述的立方体柜由六面围合而成,内部中空;其一个侧面设置有开关门,开关门的下沿距离立方体柜下底面5cm,上沿与立方体柜上表面边沿重合。
3.如权利要求1所述的植物根边缘细胞无菌培养装置,其特征在于所述的开关门与相邻的左右侧面活动连接,其外壁上设置有拉手;与开关门相邻的一个侧面内壁上设置有磁碰,磁碰与靠近开关门的侧壁内边沿重合,且开关门内壁设置有与该磁碰相对应的铁块;开关门与相邻的另一个侧面通过开关门合页相连接。
4.如权利要求1所述的植物根边缘细胞无菌培养装置,其特征在于所述的与开关门相邻的左右侧面内壁上,距下表面三分之二处设置有滑轮轨道,且滑轮轨道靠近开关门的一端设置有轨道处滑轮;抽屉隔板上设置有抽屉隔板上滑轮,并通过抽屉隔板上滑轮与滑轮轨道相连接;紫外灭菌灯设置在立方体柜的内侧面上,该内侧面与开关门对应,且紫外灭菌灯位于立方体柜上表面与抽屉隔板之间。
5.如权利要求1所述的植物根边缘细胞无菌培养装置,其特征在于所述的立方体柜的上表面开有多个通孔,用于气体流动,通孔上方设置有直径大于通孔直径、孔径为0.22微米的滤膜,用于滤除空气中微生物。
6.如权利要求1所述的植物根边缘细胞无菌培养装置,其特征在于所述的立方体柜的下表面开有底部排水孔,且设置有配套阀门,其四个直角端设置有万向轮,立方体柜中与开关门对应的侧面设置有电源线孔。
7.如权利要求1所述的植物根边缘细胞无菌培养装置,其特征在于所述的紫外灭菌灯带有防水罩;所述的抽屉隔板上设置有多个通孔,其上铺有两层浸湿纱布。
8.一种植物根边缘细胞无菌培养方法,其特征在于包括下列步骤:
步骤(1):挑选颗粒均匀饱满的植物种子,自来水洗净后用10%次氯酸钠溶液浸种10min用于种子表面杀菌,超纯水充分清洗后置于超纯水中浸泡6小时;
步骤(2):将浸泡后的种子转移至盖有湿润纱布的培养皿中,置于黑暗环境下25℃的恒温培养箱中萌发;
步骤(3):准备好所用的植物根边缘细胞无菌培养装置
准备包括:植物根边缘细胞无菌培养装置的立方体柜上表面通孔处粘贴孔径为0.22微米的滤膜,在抽屉隔板上放两层经高温灭菌的浸湿纱布,将开关门打开,放入盛有无菌水配置的0.1mM 氯化钙溶液的加湿器后关闭开关门,利用紫外灭菌灯进行紫外灭菌;
步骤(4):待种子露白后将其均匀铺置于植物根边缘细胞无菌培养装置中的抽屉隔板纱布上;加湿器喷雾培养48~72h,每隔5min喷雾一次,每次喷雾30s,昼夜温度为26~22℃,避光;培养结束后,打开装置开关门,抽出抽屉隔板对植物根边缘细胞进行原位采样;
所述的植物根边缘细胞无菌培养装置中,种子需垂直放置以防止边缘细胞的掉落;所述的实验中所用的装置和容器都需经紫外灭菌,所有溶液需采用无菌水配制;所述的喷雾流量可调节加湿器开关进行控制;所述的喷雾间隔时间可通过植物根边缘细胞无菌培养装置外加湿器插头连接的定时器加以控制。
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