[发明专利]一种提取棉花干种子基因组DNA的方法无效
| 申请号： | 201310272540.0 | 申请日： | 2013-07-01 |
| 公开（公告）号： | CN103382470A | 公开（公告）日： | 2013-11-06 |
| 发明（设计）人： | 郎需勇;游艾青;别传述;刘立清;刘定富;刘伟霞;杨亮 | 申请（专利权）人： | 湖北惠民农业科技有限公司;湖北省农业科学院粮食作物研究所 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 武汉荆楚联合知识产权代理有限公司 42215 | 代理人： | 王健 |
| 地址： | 430070 湖北省武汉市洪山*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 提取 棉花 种子 基因组 dna 方法 | ||
【权利要求书】：
1.本发明的一种提取棉花干种子基因组DNA的提取方法，包括以下步骤：
1) 取棉花干种子胚于200μL 96孔PCR板中；
2) 向装有棉花干种子胚的PCR板的每个孔中加入50μL DNA提取缓冲液，然后于94℃保持 15~20min；
3) 弃上清，重复步骤2）一遍得到棉花干种子基因组DNA原液；
4) 向装有棉花干种子胚和提取缓冲液的PCR板的每个孔中加入150μL ddH2O稀释得到棉花干种子基因组DNA工作液；
其中，步骤2）中的提取缓冲液：100mmol/L Tris，pH值8.0； 10mmol/L EDTA，pH值8.0；1mol/L KCl。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤1）所取棉花干种子胚为半胚或整胚。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于： 步骤2）中DNA提取缓冲液成分中100mmol/L Tris为100mmol/L Tris-Base，pH值8.0。
4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：步骤3）中弃上清是指96孔PCR板置于台式离心机3000rpm 2min，待棉花干种子胚沉于PCR板底部，直接倒掉上清液。
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