[发明专利]萝卜花蕾败育相关的液泡加工酶基因RsVPE1

说明书

技术领域

本发明涉及分子生物学中的基因领域，特别是一种萝卜花蕾败育相关的液泡加工酶基因RsVPE1。

背景技术

萝卜（Raphanus sativus L.）是原产于中国的一种重要的蔬菜作物，古称“莱菔”。萝卜营养丰富，药食皆宜，深受人们青睐。我国萝卜种植面积在120万公顷左右，位居各种蔬菜种植面积的前三位。

萝卜是十字花科萝卜属一年生草本植物，一般经过春化后开始花芽分化，在正常生长条件下,通过正常的现蕾、开花和结果，完成一个生命周期。在多年的育种实践中，在大白菜、萝卜等植物中经常遇到败蕾现象发生，即花蕾败育，也就是植株花蕾不能完成正常的生长发育过程，中途夭亡的现象。这种现象对于植物本身繁殖是不利的，而且花蕾败育现象在雄性不育材料、高代自交材料中发生普遍，严重者不能开花，难以留种，研究这种现象发生的机理对于认识和利用这一现象是必要的。目前，有关植物败蕾方面的研究报道很少，对于其败育死亡机理更不清楚。

液泡加工酶（vacuolar processing enzyme，VPE）属于半胱氨酸蛋白酶，在许多植物和动物中都相当保守。VPE最初是从蓖麻种子中分离出来的一种新的半胱氨酸蛋白酶。VPE可以分为以下三类：营养型VPE，种子型VPE和种皮型VPE。在植物发育和细胞程序化死亡中，VPE起着重要的作用。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种萝卜花蕾败育相关的液泡加工酶基因RsVPE1。

为了实现上述任务，本发明以萝卜败育花蕾，半败育花蕾和正常花蕾为试材，通过cDNA-AFLP分析，获得差异表达的TDF72，采用RACE方法获得了萝卜液泡加工酶基因RsVPE1的gDNA和cDNA，分别为2346bp和1470bp。

上述萝卜败蕾相关的液泡加工酶基因RsVPE1的cDNA序列如下：

1     ATGCCACCTG TCCCCGTCGC CGTTCTCCTG CTCTCCTTGA TCGCCGTATC CGCCGCGAGA

61    CAAAACCCCG AAGACGACGT CATCAAACTC CCCTCGCAAG CTTCTAGGTT CTTCCGCCCT

121   CCCAACAACG ACGACGATTC TTCATCATCC GGCACTAGGT GGGCTGTTCT AGTCGCCGGA

181   TCGAGTGGTT ACTGGAACTA CAGGCATCAG GCGGATGTTT GTCATGCTTA TCAACTTCTG

241   AGGAAAGGAG GATTGAAAGA GGAGAATATA GTGGTGTTCA TGTATGATGA TATCGCTGAT

301   AACGAAGAGA ATCCGAGGAA AGGGATCATT ATCAACAGTC CTCATGGAAG TGATGTCTAT

361   CAAGGAGTTC CCAAGGATTA CACTGGAGAT GATGTTACTG TTGATAATCT GTTTGCTGTG

421   ATTCTTGGAG ACAAGAGTTC TGTTAAGGGA GGGAGTGGGA AGGTTGTGGA TAGTGGTCCA

481   AATGATCATA TCTTCATATT CTACAGTGAC CATGGTGGTC CTGGAGTTCT CGGGATGCCG

541   ACTTCTCCTT ACTTATATGC TAATGATTTG AATGATGTGT TGAAGAAAAA ACACTCTTCC

601   GGAAACTACA AAAGTTTGGT GTTTTATCTT GAAGCTTGTG AATCTGGAAG TATCTTTGAA

661   GGGCTTCTTG AAGAGGGTTT AAACATCTAC GCCACAACTG CATCGAACGC AGTAGAAAGC

721   AGTTGGGGTA CCTATTGCCC CGGAGAGGAG CCTAGCCCTC CACCTGAGTA TGAAACTTGC

781   TTAGGTGACT TATACAGTGT TGCCTGGATG GAAGACAGTG GCGTGCACAA TCTACAAACT