[发明专利]Bostrycin在制备酪氨酸磷酸酶结合剂或抑制剂上的应用

说明书

  

技术领域

本发明涉及医药领域，涉及Bostrycin的新用途，具体地说涉及Bostrycin在制备酪氨酸磷酸酶结合剂或抑制剂上的应用。 

背景技术

人酪氨酸磷酸酶1B（protein tyrosine phosphatase 1B, PTP1B）是非受体酪氨酸磷酸酶，属于传统类蛋白质酪氨酸磷酸酶家族成员，能专一而特异地催化多肽底物的磷酸化酪氨酸残基去磷酸化。1988年，Tonks等人从人胎盘分离纯化出PTP1B，这是第一个发现的蛋白质酪氨酸磷酸酶家族成员。后来众多的PTP蛋白调控、结构和功能的成果，都是以PTP1B蛋白为基础研究发现的。PTP1B蛋白是磷酸酶研究的基石。 

PTP1B的cDNA片段含有1305个核苷酸，编码435个氨基酸的蛋白质，分子量约为50kDa。其结构包括氨基端的催化活性结构域，羧基端的内质网定位结构域和富含脯氨酸残基的片段。PTP1B的羧基端除定位于内质网外，还抑制部分PTP1B的酶活。在细胞中，PTP1B通过内质网定位结构域片段与内质网相连，钙蛋白酶切除该片段，以36kDa的胞内酶形式释放到胞质，发挥特异性去磷酸化催化功能。PTP1B切除羧基端片段后酶活能提高2倍。 

一直以来PTP1B被认为与二型糖尿病和肥胖症的发生有关，其抑制剂是治疗糖尿病和肥胖症的潜在药物。二型糖尿病又名非胰岛素依赖型糖尿病，人体自身能够产生胰岛素，但细胞无法对其作出反应。PTP1B能与胰岛素信号转导相关的蛋白，下调胰岛素受体信号通路，从而产生胰岛素抵抗。正常情况下，结合了胰岛素的胰岛素受体（Insulin receptor）会自磷酸化，激活的胰岛素受体对下游蛋白磷酸化。PTP1B作用于胰岛素受体，胰岛素信号通路就此终止。同时，PTP1B能够对胰岛素受体底物IRS1、2（IRS-1，IRS-2）去磷酸化，信号通路也由此减弱。除了能引其胰岛素抵抗，PTP1B的过表达还能引起瘦素（leptin）抵抗。肥胖症病人大多具有正常的瘦素及其受体基因，PTP1B对瘦素受体的JAK-2去磷酸化，降低信号通路。全世界有3.47亿人患有糖尿病，二型糖尿病约占全球糖尿病总数的90%。据世界卫生组织预测，到2030年糖尿病将成为全球第七大死亡原因。预计在今后10年内，由糖尿病造成的死亡总数将增加50%以上。而二型糖尿病患者往往是肥胖者，说明这两种疾病是紧密相连的。 

1994年，在乳腺癌和卵巢癌细胞发现大量表达的PTP1B。从此便发现，PTP1B与肿瘤发生有莫大的关联。PTP1B的过表达导致Src和Ras等蛋白的异常激活，抑制p62Dok活性，引起肿瘤细胞的增殖和抗凋亡。PTP1B成为抗肿瘤药物的作用靶点之一，并以其抑制剂筛选抗肿瘤药物。 

PTP1B与二型糖尿病、肥胖症和肿瘤关系密切，因此以它为靶标筛选的抑制剂可用于疾病治疗的药物和方法。目前，全世界的许多实验室都正在从天然或人工合成药物中以PTP1B作为靶点筛选高特异性的抑制剂。其中以天然活性提取物筛选的PTP1B抑制剂不仅安全高效，而且不产生副作用，为二型糖尿病、肥胖症、乳腺癌治疗带来曙光。 

发明内容

本发明的目的在于提供一种新的酪氨酸磷酸酶抑制剂或抑制/研究手段。 

本发明首次发现，Bostrycin或其衍生物或盐可用于制备酪氨酸磷酸酶结合剂或抑制剂。发明首次发现了Bostrycin抑制酪氨酸磷酸酶去磷酸化的活性。 

发明进一步提供了Bostrycin或其衍生物或盐在制备酪氨酸磷酸酶去磷酸化抑制剂上的应用。 

同时，发明提供了Bostrycin或其衍生物或盐在制备酪氨酸磷酸酶相关疾病药物上的应用。例如，在制备治疗乳腺癌、糖尿病、肥胖症药物上的应用。 

作为一种优选的方案，所述的酪氨酸磷酸为人酪氨酸磷酸酶1B。人酪氨酸磷酸酶1B与人多种疾病发生相关，如乳腺癌、二型糖尿病、肥胖症等，均由于人酪氨酸磷酸酶1B的大量表达，导致下游信号的异常激活或异常抑制。因此本发明的实施例中，采用人酪氨酸磷酸酶1B作为对象进行研究。 

本发明所采用的Bostrycin，其分子结构式为： 

可以是来源于海洋微生物天然代谢活性产物。

进一步地，发明提供了一种酪氨酸磷酸酶分析试剂盒，其含有Bostrycin或其衍生物或盐。 

同时，发明提供了一种酪氨酸磷酸酶的分析方法，其采用Bostrycin或其衍生物或盐进行酶活抑制分析。