[发明专利]基于表面等离子体共振的有机磷检测方法

权利要求书

1.一种基于表面等离子体共振的有机磷检测方法，其特征在于，包含以下步骤：

S1.提供一免疫传感芯片；其中，所述免疫传感芯片包含光子晶体结构基底、覆盖在所述基底上的金属膜以及键合在所述金属膜上的有机磷抗体OPs-Ab；

S2.将有机磷样品液结合到所述免疫传感芯片上，所述有机磷样品液中的有机磷抗原OPs-Ag与所述OPs-Ab结合，在所述免疫传感芯片上形成样品膜；

S3.将可见光或红外光以预设的入射角透过所述样品膜打在所述免疫传感芯片上，检测通过所述免疫传感芯片上的光子晶体结构反射回来的光，获得测量SPR图谱；

S4.将所述测量SPR图谱与基准SPR图谱进行比较，根据吸收峰是否有偏移，确定所述有机磷样品液中是否含有有机磷；根据吸收峰的位移量，确定有机磷的浓度。

2.根据权利要求1所述的基于表面等离子体共振的有机磷检测方法，其特征在于，所述光子晶体结构基底通过以下步骤制备：

提供一基底；

在所述基底表面上打周期性点阵结构排列的孔。

3.根据权利要求2所述的基于表面等离子体共振的有机磷检测方法，其特征在于，所述周期性点阵结构的排列形状为正方形或六边形。

4.根据权利要求1所述的基于表面等离子体共振的有机磷检测方法，其特征在于，所述光子晶体结构的晶格常数为0.8至1.2微米，占空比为1∶4。

5.根据权利要求1所述的基于表面等离子体共振的有机磷检测方法，其特征在于，所述有机磷抗体通过以下步骤键合在所述金属膜上：

在所述金属膜上修饰胺基-NH₂；

在所述胺基上修饰有机磷抗体OPs-Ab。

6.根据权利要求5所述的基于表面等离子体共振的有机磷检测方法，其特征在于，在所述金属膜上修饰胺基的步骤中，包含以下子步骤：

将覆盖了金属膜的基底放置在37℃的20毫摩尔/升巯基乙胺溶液中浸泡2小时。

7.根据权利要求5所述的基于表面等离子体共振的有机磷检测方法，其特征在于，在所述胺基上修饰有机磷抗体的步骤中，包含以下子步骤：

将所述修饰了胺基的基底放置在4℃的加入了0.2毫摩尔/升的碳二亚胺EDC和0.5毫摩尔/升的N-羟基琥珀酰亚胺NHS水溶液的OPs-Ab溶液中浸泡12小时。

8.根据权利要求1所述的基于表面等离子体共振的有机磷检测方法，其特征在于，在所述步骤S2中，包含以下子步骤：

将有机磷样品液滴到所述免疫传感芯片上，并在37℃下放置30分钟；

用PBS冲洗所述免疫传感芯片；

室温晾干或吹干，在所述免疫传感芯片上形成样品膜。

9.根据权利要求1所述的基于表面等离子体共振的有机磷检测方法，其特征在于，在所述步骤S2中，包含以下子步骤：

将所述免疫传感芯片放置在37℃的有机磷样品液中浸泡30分钟；

用PBS冲洗所述免疫传感芯片；

室温晾干或吹干，在所述免疫传感芯片上形成样品膜。

10.根据权利要求1所述的基于表面等离子体共振的有机磷检测方法，其特征在于，在所述步骤S3中，包含以下子步骤：

光源发射的可见光或红外光经入射光纤以预设的入射角透过所述样品膜打在所述免疫传感芯片上；

入射光通过所述免疫传感芯片上的光子晶体结构反射，经出射光纤进入光谱仪，得到测量SPR图谱。

11.根据权利要求1所述的基于表面等离子体共振的有机磷检测方法，其特征在于，所述基准SPR图谱通过以下步骤获得：

光源发射的可见光或红外光经入射光纤以预设的入射角打在所述免疫传感芯片上；

入射光通过所述免疫传感芯片上的光子晶体结构反射，经出射光纤进入光谱仪，得到基准SPR图谱。

12.根据权利要求1所述的基于表面等离子体共振的有机磷检测方法，其特征在于，在所述步骤S4之后，还包含以下步骤：

将形成了样品膜的免疫传感芯片放置在37℃的0.25毫克/毫升异硫氰酸荧光素FITC有机磷抗体OPs-Ab溶液中，浸泡30分钟。

13.根据权利要求1所述的基于表面等离子体共振的有机磷检测方法，其特征在于，在所述步骤S4之后，还包含以下步骤：

采用5毫摩尔/升的盐酸HCl溶液清洗所述免疫传感芯片，去除所述免疫传感芯片上形成的样品膜；

在重新结合样品膜之前，测定SPR图谱。