[发明专利]脂环酸芽孢杆菌的免疫磁性微球及其应用

权利要求书

1.脂环酸芽孢杆菌的免疫磁性微球，其特征在于，该脂环酸芽孢杆菌的免疫磁性微球是用胺基化磁性微球包被氧化脂环酸芽孢杆菌特异性抗体而得到的；所述氧化脂环酸芽孢杆菌特异性抗体的制备方法包括：利用含过硫酸钠的PBS缓冲液对脂环酸芽孢杆菌特异性抗体进行氧化处理，之后收集获得氧化脂环酸芽孢杆菌特异性抗体。

2.如权利要求1所述的脂环酸芽孢杆菌的免疫磁性微球，其特征在于，采用Sephadex G-25层析柱收集获得氧化脂环酸芽孢杆菌特异性抗体。

3.如权利要求1所述的脂环酸芽孢杆菌的免疫磁性微球，其特征在于，所述氧化脂环酸芽孢杆菌特异性抗体制备方法还包括：

所述含过硫酸钠的PBS缓冲液中过硫酸钠浓度为10mg/mL，PBS缓冲液的浓度为0.1mol/L、pH值为7.4；

所述脂环酸芽孢杆菌特异性抗体的浓度为（1-3mg）/mL；所述含过硫酸钠的PBS缓冲液与脂环酸芽孢杆菌特异性抗体的体积比为（1-3）：1。

4.如权利要求1所述的脂环酸芽孢杆菌的免疫磁性微球，其特征在于，所述胺基化磁性微球的制备方法包括：

（1）80-90℃条件下，Fe₃O₄磁核在硅酸钠溶液中进行硅烷化反应制备硅烷化磁性微球；所述硅酸钠溶液的质量浓度为4%-5%、PH大于11；

（2）调节硅烷化磁性微球的PH呈中性；

（3）80-90℃条件下，将PH呈中性的硅烷化磁性微球、甲醇、3-氨丙基三乙氧基硅烷、去离子水和甘油混合反应制备胺基化磁性微球；所述硅烷化磁性微球、甲醇、3-氨丙基三乙氧基硅烷、去离子水和甘油的用量为：

硅烷化磁性微球：        （1-2g）/毫升

甲醇：                   150体积，

3-氨丙基三乙氧基硅烷：   10体积，

去离子水：               1体积，

甘油：                   150-161体积。

5.如权利要求4所述的脂环酸芽孢杆菌的免疫磁性微球，其特征在于，所述的Fe₃O₄磁核的粒径为15-25nm、磁性的饱和磁化强度为（40-80emu）/g。

6.如权利要求4所述的脂环酸芽孢杆菌的免疫磁性微球，其特征在于，所述氧化脂环酸芽孢杆菌特异性抗体的浓度为（1-2mg）/毫升，且每毫升氧化脂环酸芽孢杆菌特异性抗体用20mg的胺基化磁性微球包被。

7.如权利要求1至6任一权利要求所述的脂环酸芽孢杆菌的免疫磁性微球，其特征在于，利用封闭液封闭所述的脂环酸芽孢杆菌的免疫磁性微球，所述封闭液的组分量为：每100ml浓度为0.01mol/L的PBS缓冲液中含有1-10克BSA和0.05ml Tween-20。

8.如权利要求1至6中任一权利要求所述的脂环酸芽孢杆菌的免疫磁性微球用于分离果汁中的脂环酸芽孢杆菌的应用。

9.如权利要求7所述的脂环酸芽孢杆菌的免疫磁性微球用于分离果汁中的脂环酸芽孢杆菌的应用。

10.如权利要求8或9所述的应用，其特征在于，所述果汁的可溶性固形物含量≤15°Brix。