[发明专利]一种从混合物中分离与富集目标组分的色谱分离方法

权利要求书

1.一种从混合物中分离与富集目标组分的色谱分离方法，其特征在于：包括由色谱柱和至少两种洗脱剂组成的分离系统；所述色谱柱内装填有能吸附目标组分的吸附剂；

所述洗脱剂包括洗脱剂1和洗脱剂2；所述洗脱剂2中具有强洗脱能力的溶剂的体积百分含量高于洗脱剂1中具有强洗脱能力的溶剂的体积百分含量；

所述吸附剂为硅胶、聚酰胺树脂、吸附树脂或离子交换树脂；

具体分离与富集过程为由多个操作周期构成的循环操作过程，第一个操作周期包括以下两个步骤：

（1）吸附目标组分：将原料溶于洗脱剂1配制成原料液，注入色谱柱，将目标组分吸附到色谱柱上，而保留时间比目标组分短的弱保留组分则流出色谱柱，收集得到洗脱液1；

（2）脱附目标组分：将洗脱剂2注入色谱柱，洗脱色谱柱内的目标组分，目标组分从色谱柱尾部流出，收集得到洗脱液2；

从第二个操作周期开始，在每一个操作周期的步骤(1)中，将原料液与在上一个操作周期内所收集的洗脱液2合并注入色谱柱，其余同第一个操作周期；

分离过程中，弱保留组分在每一个操作周期的步骤(1)中流出色谱柱，与目标组分分离；目标组分则在每一个操作周期的步骤(2)中被脱附至洗脱液2中，然后与新补充原料液中的目标组分在下一个操作周期的步骤(1)中被吸附至色谱柱，故目标组分被逐步浓缩至洗脱液2中或富集至色谱柱内，从而实现从混合物中分离与富集目标组分的目的。

2.根据权利要求1所述的从混合物中分离与富集目标组分的色谱分离方法，其特征在于：在所述每一个操作周期的步骤(2)之后为步骤(3)，所述步骤(3)为用洗脱剂1平衡色谱柱；分离与富集过程为步骤(1)、步骤(2)、步骤(3)循环进行。

3.根据权利要求1或2所述的从混合物中分离与富集目标组分的色谱分离方法，其特征在于：当目标组分在色谱柱内部不断积累，直到色谱柱饱和以至于目标组分从洗脱液1中泄漏时，停止循环操作过程，用洗脱剂2将富集于色谱柱内的目标组分洗脱出色谱柱，在色谱柱尾部收集得到被浓缩的目标组分。

4.根据权利要求1或2所述的从混合物中分离与富集目标组分的色谱分离方法，其特征在于：当目标组分在色谱柱内部不断积累，直到色谱柱饱和以至于目标组分从洗脱液1中泄漏时，在步骤(1)中用洗脱剂1代替原料液，继续循环操作，将残留在色谱柱内的非目标组分除去，而目标组分则继续被浓缩于洗脱液2中或富集于色谱柱内。

5.一种从混合物中分离与富集目标组分的色谱分离方法，其特征在于：包括由色谱柱和至少三种洗脱剂组成的分离系统；所述色谱柱内装填有能吸附目标组分的吸附剂；

    所述洗脱剂包括洗脱剂1、洗脱剂2和洗脱剂3；所述洗脱剂2中具有强洗脱能力的溶剂的体积百分含量高于洗脱剂1中具有强洗脱能力的溶剂的体积百分含量；所述洗脱剂3中具有强洗脱能力的溶剂的体积百分含量不低于洗脱剂2中具有强洗脱能力的溶剂的体积百分含量；

所述吸附剂为硅胶、聚酰胺树脂、吸附树脂或离子交换树脂；

    具体分离与富集过程为多个操作周期构成的循环操作过程，第一个操作周期包括以下三个步骤：

（1）吸附目标组分：将原料溶于洗脱剂1配制成原料液，注入色谱柱，将目标组分吸附到色谱柱上，与此同时，保留时间比目标组分长的强保留组分也被吸附在色谱柱上，而保留时间比目标组分短的弱保留组分则流出色谱柱，收集得到洗脱液1；

（2）脱附目标组分：将洗脱剂2注入色谱柱，洗脱色谱柱内的目标组分，目标组分从色谱柱尾部流出，收集得到洗脱液2；而保留时间比目标组分长的强保留组分仍然被吸附在色谱柱内；

（3）脱附强保留组分：将洗脱剂3注入色谱柱，洗脱色谱柱内的强保留组分，强保留组分从色谱柱尾部流出，收集得到洗脱液3；

从第二个操作周期开始，在每一个操作周期的步骤(1)中，将原料液与在上一个操作周期内所收集的洗脱液2合并注入色谱柱，其余同第一个操作周期；

分离过程中，弱保留组分在每一个操作周期的步骤(1)中被洗脱出色谱柱，强保留组分在每一个操作周期的步骤(3)中被洗脱出色谱柱，与目标组分分离；而目标组分则在每一个操作周期的步骤(2)中被脱附至洗脱液2中，然后与新补充原料液中的目标组分在下一个操作周期的步骤(1)中一同被吸附至色谱柱，故目标组分被逐步浓缩至洗脱液2中或富集于色谱柱内，从而实现从混合物中分离与富集目标组分的目的。