[发明专利]胆红素的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种胆红素的制备方法。

技术背景

胆红素为体内的血红蛋白分解代谢后的还原产物，胆汁的胆红素含70-80％的二葡萄糖醛酸酯，20-30％的单葡萄糖醛酸酯及微量的胆红素与葡萄糖或木糖的结合物。胆红素制品为淡橙色或深红色的单斜晶体，干燥固体较稳定，其氯仿溶液置暗处也较稳定，在碱液中或遇三价铁离子极不稳定，很快被氧化为胆绿素，而与甘氨酸、丙氨酸或组氨酸结合，加血清蛋白，维生素丙或乙二胺四乙酸二酸钠，可使其稳定。胆红素不溶于水，溶于苯，氯仿，氯苯，二硫化碳及碱液中，微溶于乙醇和乙醚。胆红素钠溶于水，不溶于氯仿，其钙盐、镁盐或钡盐不溶于水，这些理化性质是制备胆红素的基础。

胆红素为人工合成牛黄的主要原料之一，在我国名贵的百余种成药中，都有人工牛黄。但是近几年由于胆红素供应不足，导致人工牛黄的产量有多下降，鉴于我国广大乡镇的猪胆汁资源尚未充分利用，故胆红素生产的潜力很大。

发明内容

本发明为了利用猪胆汁有效的提高胆红素的收得率，提供一种胆红素的制备方法。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：胆红素的制备方法，包括以下几个步骤：

(1)、胆色素钙盐的提取：取经纱布过滤的洁净的新鲜猪胆汁，加比重为1.02-1.035的石灰乳，充分搅拌均匀密封保存24小时，再通蒸汽加热至50-60度将浮起的白色泡沫除去，到70度开始出现胆色素钙盐小颗粒，到95度液面上浮起桔红色胆色素钙盐，取浮于液面的胆色素钙盐及沉淀于底部的胆色素钙盐小颗粒，用细布过滤、压干，可得到桔黄色胆色素钙盐；再取滤液降温至50度，加工业盐酸，酸化回收猪结合胆汁酸；

(2)、一次酸化：将胆色素钙盐加半倍水搅成糊状，过80目筛，按胆色素钙盐量加入0.5-1％亚硫酸氢钠，在不断搅拌下，缓加1∶1稀盐酸，酸化至ph值1-2，放出酸水，沉淀过滤；

(3)、二次酸化：取沉淀物先加少量乙醇搅拌成糊状，而后加约10倍90-95％乙醇及0.5-1.0％亚硫酸氢钠，再加1∶1稀盐酸调ph至3.0，静置沉淀，吸去上清液乙醇，底部沉淀再以10倍量乙醇洗涤一次，吸去上清液，取沉淀物用绸布滤干，所得为胆红素粗品；

(4)、精制：加入6-10倍量氯仿，分三次回流提取，每次回流提取2-3小时后，分取下层氯仿提取液，将三次氯仿提取液合并；蒸馏回收氯仿至胆红素结晶析出，加适量95％乙醇，继续蒸馏，除尽溶液内的氯仿；将胆红素抽滤，滤去乙醇，用少量微热的95％乙醇和蒸馏水各洗一次，再以少量无水乙醇、丙酮、乙醚分次洗涤，真空干燥，得胆红素精品。

本发明的有益效果是：新鲜猪胆汁及时加工成胆色素钙盐，较稳定，胆汁中的胆红素不致氧化成胆绿素，放室温下可保存较长时间，能有效的将猪胆汁利用和保存起来，利用新鲜的猪胆汁加工，可以提高胆红素的收得率。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步的说明。

胆红素的制备方法，包括以下几个步骤：

(1)、胆色素钙盐的提取：取经纱布过滤的洁净的新鲜猪胆汁，加比重为1.02-1.035的石灰乳，充分搅拌均匀密封保存24小时，再通蒸汽加热至50-60度将浮起的白色泡沫除去，到70度开始出现胆色素钙盐小颗粒，到95度液面上浮起桔红色胆色素钙盐，取浮于液面的胆色素钙盐及沉淀于底部的胆色素钙盐小颗粒，用细布过滤、压干，可得到桔黄色胆色素钙盐；再取滤液降温至50度，加工业盐酸，酸化回收猪结合胆汁酸；

(2)、一次酸化：将胆色素钙盐加半倍水搅成糊状，过80目筛，按胆色素钙盐量加入0.5-1％亚硫酸氢钠，在不断搅拌下，缓加1∶1稀盐酸，酸化至ph值1-2，放出酸水，沉淀过滤；

(3)、二次酸化：取沉淀物先加少量乙醇搅拌成糊状，而后加约10倍90-95％乙醇及0.5-1.0％亚硫酸氢钠，再加1∶1稀盐酸调ph至3.0，静置沉淀，吸去上清液乙醇，底部沉淀再以10倍量乙醇洗涤一次，吸去上清液，取沉淀物用绸布滤干，所得为胆红素粗品；

(4)、精制：加入6-10倍量氯仿，分三次回流提取，每次回流提取2-3小时后，分取下层氯仿提取液，将三次氯仿提取液合并；蒸馏回收氯仿至胆红素结晶析出，加适量95％乙醇，继续蒸馏，除尽溶液内的氯仿；将胆红素抽滤，滤去乙醇，用少量微热的95％乙醇和蒸馏水各洗一次，再以少量无水乙醇、丙酮、乙醚分次洗涤，真空干燥，得胆红素精品。