[发明专利]苦荞标准提取物FT83及高纯度槲皮素的制备方法

说明书

 

技术领域

本发明属于植物有效成份的提取、精制、纯化技术领域，具体是从苦荞麸皮中制备苦荞黄酮标准提取物FT83和高纯度槲皮素的方法。

背景技术

苦荞（Fagopyrum tataricum (L.) Gaench.)为蓼科荞属植物，原产于我国西南山区，广泛种植于西部地区。是我国西南高山地区少数民族的传统农作物和主要粮食作物。麸皮为苦荞加工过程中的副产物，富含黄酮类成分。苦荞黄酮含芦丁2.0-4.0%，槲皮素0.5-1.0%（结构见附图1），是开发功能性保健食品的原料。

已授权的相关专利《一种从苦荞麸皮中提取黄酮的方法》（公开号 CN 101062114 A）是将苦荞麸皮制成颗粒状、脱脂、提取、浓缩、离心、干燥。该发明制备过程采用制粒、脱脂等繁琐步骤，产业化有一定难度。该方法用分光光度法检测提取物的黄酮含量大于75%，误差甚大，且未能进行主要成分的含量分析。

槲皮素具有扩张冠状动脉、降低毛细血管通透性和脆性、降血脂、降血糖、降血压、抗血小板聚集、抗炎、抗病毒、抗过敏、镇痛、抗氧化清除自由基、调节免疫功能、抗脂质过氧化、抑制肿瘤细胞的增值等生理活性，是天然药品和功能性保健食品的天然资源。槲皮素在植物中分布较广，已报道的制备方法多样。以苦荞麸皮为原料，用简易方法将芦丁降解为槲皮素，通过柱层析分离纯化，制备高纯度槲皮素的方法，尚未见报导。

发明内容

本发明的目的是提供一种以苦荞麸皮为原料，制备富含槲皮素的苦荞标准提取物FT83及制备高纯度的槲皮素的方法。

为了实现本发明的上述目的，本发明的技术方案如下：

以苦荞麸皮为原料，在低级醇溶液中，将苦荞麸皮中的芦丁降解，转化为槲皮素，制备富含槲皮素的苦荞标准提取物FT83，进一步以该标准提取物为原料，经柱层析分离纯化，制备高纯度的槲皮素。具体方法如下：

１）将苦荞麸皮浸入60-95%的低级醇中，液料比为1：6-1：12，每天搅拌一次，浸泡7-9天，提取三次，过滤，合并滤液，得到醇提取液；或用超声波提取，提取时间为30-60min/次，超声提取3次，超声频率不低于26 KHZ；

    ２）将上述提取溶液减压浓缩到样品溶剂基本不含醇，离心5-10 min，弃去上清液，沉淀部分加入适量水混悬，过60目筛，调节相对密度1.05-1.08，喷雾干燥，或者将沉淀部分直接冷冻干或加热干燥或真空干燥或减压干燥，即得苦荞标准提取物FT83；

３）步骤2）所得的苦荞标准提取物FT83，用柱层析纯化，以不同浓度（水、20%、40%、60%、80%、90%、100%）的甲醇或乙醇溶剂梯度洗脱；或者以不同比列的氯仿和甲醇（40：1-20：1）梯度洗脱。以硅胶薄层层析（TLC）检测，指导收集槲皮素部位，合并富集槲皮素部位样品溶液，经浓缩、干燥、甲醇溶解、重结晶2次，即得高纯度槲皮素。

所述的苦荞麸皮为苦荞种子加工过程中废弃的种皮，苦荞麸皮中的主要黄酮成分是芦丁和槲皮素，苦荞麸皮含芦丁2.0-4.0%，槲皮素0.5-1.0%。苦荞麸皮中的芦丁在甲醇、乙醇等溶剂中自然降解或在以上溶剂中超声波辅助降解的方法将芦丁基本上都转化成槲皮素。

所述超声波提取的超声频率不低于26 KHZ。

２）步骤所述离心转速为3000-5000r/min。

步骤３）中所述柱层析纯化时，柱层析的分离材料是硅胶，或氧化铝，或聚酰胺，用硅胶或氧化铝为分离材料时，以氯仿和甲醇（40：1-20：1）的混合溶剂为洗脱剂；用聚酰胺为分离材料时，用不同体积浓度（水、20%、40%、60%、80%、100%）的甲醇或乙醇为洗脱剂。 

　　步骤３）中所述薄层层析的条件为，展开剂:苯-乙酸乙酯-甲酸4：5：1；显色剂：5%三氯化铁乙醇溶液。

 用本发明的方法从苦荞麸皮提取制备的苦荞标准提取物FT83，为淡黄色至黄色粉末，有荞麦特殊香味，味微苦。微溶于热水，易溶解于乙醇、甲醇。紫外分光光度法（UV)测定，总黄酮含量大于80.0%，高效液相色谱法（HPLC）定量分析，槲皮素含量不低于30%，得率按原料计算，不低于6.0%。由该标准提取物制备的高纯度槲皮素，含量达95.0%以上（HPLC)。按该发明提供的方法制备的产品，质量稳定，制备工艺简单、无污染、成本低，适宜于工业化生产。

附图说明

图1 为芦丁和槲皮素的化学结构图。

图2 为纯化结晶后的槲皮素的HPLC图。