[发明专利]二氢杨梅素在诱导癌细胞自噬上的应用

说明书

技术领域

 本发明涉及细胞自噬领域，更具体地，涉及二氢杨梅素在诱导癌细胞自噬上的应用。

背景技术

肝细胞癌（hepatocellular carcinoma, HCC）是一种临床致死率极高的癌症。全世界每年新发肝癌患者约六十万，居恶性肿瘤的第五位。目前我国发病人数约占全球的半数以上，占全球肝癌病人的55%，已经成为严重威胁我国人民健康和生命的一大杀手，其危险性不容小视。目前临床应对肝癌治疗的方法有：手术治疗，包括肿瘤切除和肝移植；经皮干预措施，包括无水酒精注射和射频消融；经动脉干预，包括栓塞化疗，放射治疗和药物以及基因和免疫疗法等。随着传统中药的抗癌机制逐步被揭示，越来越多的研究者开始尝试从天然植物提取物中寻求治疗癌症的特效成分。

    二氢杨梅素（Dihydromyricetin, DHM），又名蛇葡萄素（Ampelopsin）。提取自葡萄科蛇葡萄属植物藤茶的叶中，属黄酮类化合物，其分子式为C15H12O8。有研究证明，DHM可加速乙醇代谢产物乙醛的快速分解，从而降低酒精对肝脏的损害，另外，DHM已被证明的护肝作 用还包括改善肝细胞损伤引起的血清乳酸脱氢酶活力增加，抑制肝性M细胞胶原纤维形成等。目前有研究证明DHM具有一定的抗肿瘤作用。

细胞凋亡（apoptosis），是指为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡过程。细胞凋亡受到多个基因严格调控，包括Caspase家族，Bcl2家族，癌基因如C-myc、抑癌基因P53等。

细胞自噬(autophagy)是真核生物中进化保守的对细胞内物质进行周转的重要过程。该过程中一些损坏的蛋白或细胞器被双层膜结构的自噬小泡包裹后，送入溶酶体(动物）或液泡（酵母和植物 ）中进行降解并得以循环利用。目前对自噬在学术界存在三种不同的观点：①自噬可作为始因诱导凋亡的发生，阻断自噬将延缓凋亡，而广谱Caspase抑制剂虽能有效抑制凋亡的发生，但对自噬却不产生影响；②低程度的自噬可拮抗凋亡的发生，在此时若阻断自噬则会增加细胞对凋亡信号的敏感性；③自噬与凋亡相互独立存在，抑制其中任何一条途径都会将细胞推向另一程序性死亡。综上所述，自 噬是维持细胞的内平衡，协助维持细胞回归正常状态的重要机制。利用中药中的活性成分诱导癌细胞自噬，可以做为癌症治疗的备选方案之一。

发明内容

本发明提供一种可诱导肝癌细胞自噬的药物：二氢杨梅素。该药物通过影响mTOR信号通路相关蛋白的表达变化，从而诱导肝癌细胞自噬。

为实现上述目的，二氢杨梅素在制备诱导癌细胞自噬上的药物中的应用。

    所述药物对癌细胞自噬的诱导作用是通过抑制mTOR蛋白表达发挥作用的。

    所述癌细胞为肝癌细胞。

    所述的癌细胞自噬过程中的诱导因素为抑制癌细胞中的mTOR蛋白的表达。

    根据需求再提供一种二氢杨梅素在制备mTOR蛋白抑制剂、ErK蛋白抑制剂或AMPK蛋白激活剂中的应用。

    根据需求再提供一种二氢杨梅素在制备mTOR、ErK、或AMPK蛋白的研究制剂上的应用。

    根据需求再提供一种二氢杨梅素在研究mTOR、ErK、或AMPK蛋白，以及它们的底物蛋白的生物学功能上的应用。

    根据需求再提供一种二氢杨梅素在制备癌细胞自噬启动剂和/或诱导剂上的应用。

    所述的癌细胞为肝癌细胞。

本发明的优点在于，

    1. 本发明公开了二氢杨梅素在诱导癌细胞自噬方面的作用，通过诱导细胞自身调控（自噬作用），帮助机体内的非正常细胞（癌细胞）回归其正常状态或通过过度自噬作用诱导其走向凋亡途径。

2. DHM可以通过抑制细胞自噬通路（mTOR信号通路）以实现其对细胞自噬的诱导作用。具体来说，DHM可作用于mTOR的上游蛋白ErK，通过抑制ErK的表达以实现对mTOR蛋白表达的抑制；同时DHM也可以通过上调mTOR上游AMPK蛋白的表达，负作用于mTOR从而使得mTOR表达受到抑制，进一步诱导癌细胞自噬。

3. 作为一种非细胞毒性的药物，DHM可靶向性地作用于癌细胞有效抑制癌细胞增殖并诱导癌细胞的凋亡，而对正常细胞无影响。

附图说明

图1：不向培养液中添加DHM时，透射电镜下肝癌细胞HepG2的亚显微结构及自噬小泡数量（黑色箭头示细胞中自噬小泡）。

图2：向培养液中添加DHM为10μM时，透射电镜下肝癌细胞HepG2的亚显微结构及自噬小泡数量（黑色箭头示细胞中自噬小泡）。