[发明专利]一种R型白藜芦醇二聚体、其制备方法及其降血糖用途

说明书

技术领域

本发明涉及天然药物化学领域，具体涉及一种白藜芦醇二聚体(7R,8R)-trans-δ-viniferin，其制备方法及其降血糖的用途。

背景技术

手性化合物尤其是手性药物对映体的分离，在药物研究和医药工业发展方面具有重要意义。含有手性中心的药物，其药理和毒理作用却存在着差异，往往一种立体异构体有药效而它的镜像分子却药效很小，甚至完全没有药效或具有副作用。手性拆分技术中高效液相色谱（HPLC）发挥着极其重要的作用，但价格昂贵，采用HPLC法进行制备性分离的溶剂消耗量也很大。

高速逆流色谱是一种基于样品在两相互不相溶的溶剂之间分配系数不同而实现分离和制备的新技术。将逆流色谱应用于手性化合物的分离，不需要采用化学手段将手性试剂键合到固体介质上，而只需将合适的手性试剂添加到液态固定相或者流动相中即可。同一根逆流色谱分离柱可以反复多次的用于不同手性化合物的分离，只需选择合适的两相溶剂体系和手性试剂即可。同时，只要通过调节加入到固定相或流动相中的手性试剂的量，同一根逆流色谱柱既可用于手性分析，也可用于手性制备性分离。

化合物trans-δ-viniferin（简称TVN）为白藜芦醇二聚体：

是1977年从葡萄中分离得到的天然产物，在天然药物或中药中分离得到的此化合物都是以外消旋体的形式得到的。在实验室中利用苦瓜过氧化物酶对白藜芦醇进行生物转化，也可得到外消旋体的TVN。

目前，对此化合物活性的报道仅限于较强的抗氧化作用，之前我们申请的专利（公开号：CN 101433534A），通过体外活性测试发现，TVN外消旋体对α-糖苷酶抑制能力为阿卡波糖的254倍。

发明内容

本发明公开了一种TVN的光学异构体，即结构式I的(7R,8R)-trans-δ-viniferin，简称(R,R)-TVN，结构式如下：

本发明还公开了结构式I的(7R,8R)-trans-δ-viniferin的手性制备方法及其医药用途。

通过对外消旋体TVN得手性高速逆流色谱（HSCCC）拆分得到(7R,8R)-trans-δ-viniferin（I，(R,R)-TVN）和(7S,8S)-trans-δ-viniferin（(S,S)-TVN）两种光学纯的化合物。

结构式I的化合物可用以下方法制备得到：

利用苦瓜过氧化物酶对白藜芦醇进行生物转化，转化产物经硅胶柱色谱，用氯仿：甲醇作为洗脱剂冲洗，再经过制备HPLC，得到TVN外消旋体。TVN外消旋体经过高速逆流色谱，可得到(R,R)-TVN和(S,S)-TVN两种光学纯的化合物。高速逆流色谱的操作步骤包括：将正己烷：乙酸乙酯：水=4.8-5.2:4.8-5.2:9.8-10.2按对应的体积比配制两相溶剂，上相为固定相，下相加入22-28mmol/L羟丙基-β-环糊精作为流动相，从头端往高速逆流色谱仪中泵入固定相，待管路充分充满固定相后转动主机，同时泵入流动相，待管路出口处有明显流动相流出时，将TVN外消旋体溶于少量上相中注入样品池，同时开始采集数据，按峰接收目标成分。

药效学试验结果表明，(R,R)-TVN可以显著降低蔗糖所致的小鼠高血糖，其效果比TVN外消旋体强。而它的对映异构体(S,S)-TVN不能显著降低蔗糖所致的小鼠高血糖。

下面是部分药效学试验及结果：

小鼠平均每只体重为22-25g。随机分为6组，每组动物10只。各组动物禁食12小时后灌胃给药。

正常对照组：给予与阳性对照等体积的0.5%CMC-Na溶液；

阴性对照组：给予与阳性对照等体积的0.5%CMC-Na溶液；

阿卡波糖组：给予0.5%CMC-Na溶液配制成0.33mg/mL阿卡波糖的混悬液0.3mL/10g体重；

TVN外消旋体组：给予0.5%CMC-Na溶液配制成0.33mg/ml的TVN外消旋体混悬液0.3ml/10g体重；

(S,S)-TVN组：给予0.5%CMC-Na溶液配制成0.33mg/ml的(S,S)-TVN混悬液0.3ml/10g体重；

(R,R)-TVN组：给予0.5%CMC-Na溶液配制成0.33mg/ml的(R,R)-TVN混悬液0.3ml/10g体重；