[发明专利]一种生物样品纯化的装置及其应用有效
申请号: | 201310237476.2 | 申请日: | 2013-06-14 |
公开(公告)号: | CN104236984B | 公开(公告)日: | 2017-11-21 |
发明(设计)人: | 张丽华;赵群;杨开广;吴慈;张玉奎 | 申请(专利权)人: | 中国科学院大连化学物理研究所 |
主分类号: | G01N1/34 | 分类号: | G01N1/34 |
代理公司: | 沈阳科苑专利商标代理有限公司21002 | 代理人: | 马驰 |
地址: | 116023 *** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 生物 样品 纯化 装置 及其 应用 | ||
1.一种生物样品纯化的装置,其特征在于:
包括两根捕集柱和连接件,于强阳或强阴离子交换捕集柱(3)中填充强阳或强阴离子交换材料,于反相捕集柱(5)中填充反相材料,两根捕集柱间用保护柱与分析柱连接件(4)连接;
样品固载过程中,于强阳/强阴离子交换捕集柱(3)的远离反相捕集柱(5)的一端设有进样头(2),进样头(2)与注射器(1)相连;反相捕集柱(5)的远离强阳/强阴离子交换捕集柱(3)的一端与废液管(6)相连;该装置的连接顺序从进样端开始依次为:注射器(1)与进样头(2)相连,进样头(2)与强阳/强阴离子交换捕集柱(3)相连,强阳/强阴离子交换捕集柱(3)与保护柱与分析柱连接件(4)相连,保护柱与分析柱连接件(4)与反相捕集柱(5)相连,反相捕集柱(5)与废液管(6)相连;生物样品采用注射针(1),通过进样头(2)注入,先后通过两根捕集柱(3)和(5),并保留于反相捕集柱(5)上;
最后,将样品从反相捕集柱上洗脱下来,收集洗脱液,即为纯化后的生物样品;样品洗脱过程中,从装置上取下反相捕集柱(5),于反相捕集柱(5)一端设有进样头(2),进样头(2)与注射器(1)相连;反相捕集柱(5)的另一端与收集管(7)相连,该装置的连接顺序从进样端开始依次为:注射器(1)与进样头(2)相连,进样头(2)与反相捕集柱(5)相连,反相捕集柱(5)与收集管(7)相连。
2.根据权利要求1所述的装置,其特征在于:
强阳/强阴离子交换捕集柱(3)和反相捕集柱(5)的柱管内部为横截面直径为0.3-7mm的圆柱体,柱管长度为0.5-3cm,材质为抛光不锈钢或石英毛细管或塑料;于捕集柱的内部二端均设有筛板,筛板孔径为3nm-20μm。
3.根据权利要求1所述的装置,其特征在于:
根据权利要求1所述的装置,其特征在于:强阳离子交换材料为含有磺酸基团或磷酸基团的硅胶,或强阳离子交换材料为含有磺酸基团或磷酸基团的聚合物基质材料,其中聚合物基质是聚丙烯酸酯类基质、聚苯乙烯类基质、聚丙烯酰胺类基质中任意一种;
强阴离子交换材料是含有季铵基团的硅胶,或强阴离子交换材料是含有季铵基团的聚合物基质材料,其中聚合物基质是聚丙烯酸酯类基质、聚苯乙烯类基质、聚丙烯酰胺类基质中任意一种;
反相材料是含有C4、C8、C12或C18基团的硅胶,或反相材料是含有C4、C8、C12或C18基团的聚合物基质材料,其中聚合物基质是聚丙烯酸酯类基质、聚苯乙烯类基质、聚丙烯酰胺类基质中任意一种。
4.一种权利要求1、2或3所述装置的应用,其特征在于:
所述装置用于生物样品的纯化。
5.根据权利要求4所述装置的应用,其特征在于:
所述生物样品为含有表面活性剂和盐的生物样品,为:细胞提取液、胞浆提取液、血浆提取液、蛋白质溶液、或多肽溶液。
6.根据权利要求5所述装置的应用,其特征在于:
单次注入样品,即可完成表面活性剂和盐类的同时去除。
7.根据权利要求4所述装置的应用,其特征在于:需要纯化的生物样品中同时含有两大类物质,一类是阳离子或阴离子表面活性剂或构成表面活性剂的离子液体,其中阳离子表面活性剂是胺盐型表面活性剂、季铵盐型表面活性剂、杂环类阳离子表面活性剂、鎓盐型表面活性剂中一种或几种;阴离子离子液体是磺酸盐型、羧酸盐型、硫酸酯盐型、磷酸酯盐型表面活性剂中一种或几种;构成表面活性剂的离子液体是咪唑类离子液体、吡啶类离子液体、季铵盐离子液体、季鏻盐离子液体、吡咯盐离子中一种或几种;另一类是盐类,其中盐类是尿素、三羟甲基氨基甲烷-盐酸盐、钠盐、钾盐、铵盐、醋酸盐、甲酸盐、碳酸盐、磷酸盐中一种或几种;
若生物样品中含有阳离子表面活性剂和盐类或构成表面活性剂的离子液体和盐类,则靠近注射器一侧的捕集柱中填装强阳离子交换材料,生物样品的pH需调节至pH≥8;
若生物样品中含有阴离子表面活性剂和盐类,则靠近注射器一侧的捕集柱中填装强阴离子交换材料,生物样品的pH需调节至pH≤4。
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