[发明专利]小槐花提取物及提取方法和提取物的新用途

权利要求书

1.小槐花提取物，其特征是以小槐花植物全草为原料，经70～90%v/v乙醇水回流或冷浸提取，回收溶剂乙醇，得乙醇总提物浸膏；乙醇总提物浸膏用水分散，依次分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，回收萃取剂得石油醚萃取物浸膏、乙酸乙酯萃取物浸膏和正丁醇萃取物浸膏；小槐花乙醇总提物浸膏、乙酸乙酯萃取物浸膏皆为为褐色胶状浸膏，小槐花乙醇总提物浸膏、乙酸乙酯萃取物浸膏的乙醇溶液用紫外分光光度扫描，在230-440nm间有吸收峰，从小槐花提取物乙酸乙酯萃取物浸膏中分离得到羽扇豆醇，从小槐花提取物正丁醇萃取物浸膏中分离得到当药黄素；小槐花乙酸乙酯萃取物浸膏、羽扇豆醇和当药黄素具有抗凝血活性。

2.如权利要求1所述小槐花提取物的提取方法：其特征是指从小槐花中提取乙酸乙酯萃取物浸膏、羽扇豆醇和当药黄素的方法，依次按下列步骤在一定条件下进行提取：

（1） 干燥的小槐花全草用70%-90%乙醇回流提取或冷浸得乙醇提取液；

（2） 乙醇提取液减压蒸馏回收乙醇后，得乙醇总提物浸膏；

（3） 乙醇总提物浸膏溶于水得乙醇总提物浸膏水分散液；

（4） 水分散液用石油醚萃取，弃有机相，保留水相1；

（5） 水相1用乙酸乙酯萃取，得有机相乙酸乙酯萃取液和水相2；

（6） 乙酸乙酯萃取液蒸馏回收乙酸乙酯得乙酸乙酯萃取物浸膏；

（7） 乙酸乙酯浸膏经水分散后用硅胶柱拌样上柱，进行硅胶柱层析分离，用石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，得羽扇豆醇洗脱液；

（8） 羽扇豆醇洗脱液回收有机溶剂后得羽扇豆醇；经乙酸乙酯溶剂重结晶得羽扇豆醇纯品；

（9） 步骤（5）的水相2用正丁醇萃取，得正丁醇萃取液，水相弃；

（10）正丁醇萃取液蒸馏回收有机溶剂得正丁醇浸膏；

（11）正丁醇浸膏经水分散后，经大孔树脂柱层析，甲醇梯度洗脱得60%甲醇洗脱液；（12）60%甲醇洗脱液经硅胶柱层析，氯仿-甲醇梯度洗脱得当药黄素洗脱液；

（13）当药黄素洗脱液回收有机溶剂得当药黄素。

3.根据权利要求2所述的小槐花提取物的提取方法，其特征是各步骤工艺条件为：

（1）每次乙醇重量为干燥的小槐花全草的2-4倍，乙醇回流提取时间为2小时或乙醇冷浸7天，反复提取三次，合并三次提取液得乙醇提取液；

（2）乙醇提取液减压蒸馏回收乙醇后得小槐花乙醇总提物浸膏；

（3）乙醇总提物浸膏用10~12倍量水溶解分散；

（4）水分散液用2~4倍体积的石油醚反复萃取5次，弃有机相，留水相1；

（5）水相1用2~4倍体积的乙酸乙酯反复萃取5次，合并萃取液得乙酸乙酯萃取液和水相2；

（6）乙酸乙酯提取液减压蒸馏回收乙酸乙酯后得小槐花乙酸乙酯提取物浸膏；

（7）乙酸乙酯浸膏经乙酸乙酯分散后用80目硅胶拌样，重量比浸膏:硅胶=1:1.5，上硅胶柱层析，硅胶粒度200-300目，经石油醚-乙酸乙酯体积比100:1~ 0:1溶剂体系梯度洗脱，经TLC检测并合并相同流分，得5个组分，组分编号为B₁ –B₅，组分B₂经硅胶柱色谱，用石油醚:乙酸乙酯=15:1洗脱液洗脱，得羽扇豆醇洗脱液；

（8）羽扇豆醇洗脱液回收有机溶剂后得羽扇豆醇粗品；经乙酸乙酯溶剂重结晶得羽扇豆醇纯品；

（9）水相2以正丁醇分别萃取5次，合并得正丁醇萃取液；

（10）正丁醇萃取液减压蒸馏回收正丁醇，得正丁醇萃取物浸膏；

（11）正丁醇萃取物浸膏经水分散后，经大孔树脂柱色谱分离，大孔树脂为HPD-100，依次用水、20%甲醇、40%甲醇、60%甲醇、80%甲醇、100%甲醇洗脱，取60%甲醇洗脱液； （12）60%甲醇洗脱液经硅胶柱色谱经体积比氯仿:甲醇=30:1-0:1溶剂系统梯度洗脱，经TLC检测并合并相同流分，得4个部分（D₁-D₄)，组分D₂经柱层析经体积比氯仿:甲醇=20:1-0:1溶剂系统梯度洗脱，经硅胶柱色谱，Sephadex LH-20凝胶柱色谱，反复柱层析得到当药黄素洗脱液；

（13）当药黄素洗脱液回收有机溶剂得当药黄素。