[发明专利]一种栀子红色素的生产和精制方法

权利要求书

1.一种栀子红色素的生产和精制方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）栀子苷的制备：栀子黄水提液经大孔树脂吸附平衡后，上柱，经去离子水和20%乙醇洗脱得到栀子苷液；

（2）栀子苷的预处理：栀子苷液浓缩去醇后加入氢氧化钠进行碱解反应，再加入柠檬酸进行酸化；

（3）栀子红的转化：将预处理后的栀子苷和谷氨酸钠加到黑曲霉发酵液中，保温反应得到栀子红色素转化液；

（4）灭酶：栀子红转化液用沸水浴灭酶，自然冷却，离心，取上清液待用；

（5）精制：用酸调沉淀法或树脂法将灭酶后的栀子红色素转化液上清液进行精制得到栀子红色素粉末。

2.根据权利要求1所述的栀子红色素的生产和精制方法，其特征在于：

步骤（1）中所述的栀子黄水提液通过如下方法得到：栀子果经粉碎过40目筛，称取15g栀子果粉末加150mL去离子水，60℃水浴30min，过滤得一次提取液；滤渣加入100mL水再次浸提，过滤得二次提取液；滤渣加50mL水，进行第三次浸提，过滤得三次提取液，将提取液混合，抽滤得到栀子黄水提液；

步骤（1）中所述的大孔树脂为AB-8型大孔树脂；所述的洗脱的条件为：洗脱流速为1.5mL/min，去离子水、20%乙醇用量分别为AB-8型大孔树脂床体积BV的4倍和5倍。

3.根据权利要求1所述的栀子红色素的生产和精制方法，其特征在于：步骤（2）中所述的浓醇去醇为将350mL栀子苷液在温度60℃、真空度-0.09MPa、转速30r/min条件下用旋转蒸发仪浓缩至50mL左右，用手持糖量计测浓缩后栀子苷糖度要大于3°BX。

4.根据权利要求1所述的栀子红色素的生产和精制方法，其特征在于步骤（2）栀子苷的预处理为：每100mL浓缩去醇后的糖度大于3°BX的栀子苷中添加10-14g氢氧化钠，40-70℃磁力搅拌3-8h进行碱解反应后，再添加25-30g柠檬酸，搅拌至柠檬酸溶解后，4℃静置10h以上备用。

5.根据权利要求4所述的栀子红色素的生产和精制方法，其特征在于栀子苷的预处理为：每100mL浓缩去醇后的糖度为3.2°BX的栀子苷中加10g氢氧化钠，40℃磁力搅拌3h进行碱解反应后，再添加25g柠檬酸，搅拌至柠檬酸溶解后，4℃静置10h以上备用。

6.根据权利要求1所述的栀子红色素的生产和精制方法，其特征在于步骤（3）中所述的黑曲霉发酵液为通过如下方法制备得到：

1）菌种活化：黑曲霉菌种接种到PDA斜面培养基上，30℃培养3-5d至孢子成熟；2）种子液制备：从PDA斜面上取3环黑曲霉接入种子培养基中，30℃，180r/min摇床培养3d；所述的种子培养基包含如下按质量百分比计的成分：葡萄糖 1%，酵母膏 0.5%，NaNO₃ 0.3%，MgSO₄·7H₂O 0.2%，KH₂PO₄ 0.2%，余量为水；3）发酵液制备：将种子液接入发酵培养基中，30℃，180r/min摇床培养3-5d；所述的发酵培养基包含如下按质量百分比计的成分：麸皮2%，硫酸铵0.3%，KH₂PO₄ 0.2%，MgSO₄·7H₂O 0.2%，余量为水。

7.根据权利要求1所述的栀子红色素的生产和精制方法，其特征在于步骤（3）中所述的预处理后的栀子苷添加量与发酵液体积比为1:5-7:5，谷氨酸钠添加量与添加的预处理后的栀子苷液固液质量比为4:30-7:30，保温反应的条件为40-70℃真空保温10-30h。

8.根据权利要求7所述的栀子红色素的生产和精制方法，其特征在于：所述的预处理后的栀子苷添加量与发酵液体积比为3:5，谷氨酸钠添加量与添加的预处理后的栀子苷液固液质量比为6:30，保温反应的条件为50℃真空保温25h。

9.根据权利要求1所述的栀子红色素的生产和精制方法，其特征在于：步骤（4）中所述灭酶的条件为：栀子红转化液沸水浴0.5-3h，冷却，6000r离心18min，取上清液待用。

10.根据权利要求1所述的栀子红色素的生产和精制方法，其特征在于：

步骤（5）中所述的酸调沉淀法具体为：将灭酶后的栀子红色素转化液上清液与水进行1:1比例混合后再用质量分数为18%的盐酸调pH至2.8-3.0，静置1d后，10000r离心20min，沉淀物于60℃烘箱干燥得到栀子红色素粉末；

步骤（5）中所述的树脂法具体为：将灭酶后的栀子红色素转化液上清液上柱，经大孔树脂吸附平衡后，用去离子水洗脱至洗脱液无色，再分别用70%乙醇和含碳酸氢钠1‰的60%乙醇进行洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥得到栀子红色素粉末；所述的大孔树脂优选为GDX-103大孔树脂。