[发明专利]一种CD25纳米抗体、其编码序列及应用

说明书

技术领域

本发明属于生物医学或生物制药技术领域，涉及一种针对于CD25分子的纳米抗体、其编码序列及应用。

背景技术

CD25（IL-2α-链受体或IL2RA），是I型跨膜糖蛋白，具有一个的信号肽、一个胞外区、一个跨膜区和一个胞质域。IL2RA在活化的T细胞和调节性T细胞中表达，能够自身低亲和结合IL2。然而，当相关的IL2RA与白细胞介素2受体的β和γ链非共价结合时产生一种配体诱导的高亲和力异源三聚受体复合物，并随后启动胞内信号通路，如MAPK或JAK/STAT信号通路。白细胞介素2受体复合物通过调节T细胞的增殖，活化和的其他淋巴功能介导白细胞介素2的效应，已被证实IL2Rα将IL2运输至信号复合体并充当信号转导的调节子。另外，IL-2通过IL2反应增强子诱导IL2R转录，IL2R通过负反馈回路激活CTLA-4或FOXP3表达从而抑制IL2基因的表达。CD25已被作为树突状细胞（DC）激活的标记，因小鼠和人的DC可以表达CD25而不表达IL-2受体的β-链，这是IL-2信号执行必不可少的。IL2RA（CD25）基因是活化的T淋巴细胞高表达的高亲和受体分子的主要成分。癌的生长和发展与先天免疫系统的刺激有关联，包括免疫细胞中增强白细胞介素2受体（IL-2R）的表达及其形成可溶性白细胞介素-2受体（sIL-2Rα）的循环中。在大多数血液恶性肿瘤，包括不同类型的白血病和淋巴瘤，已经发现sIL-2Rα在肿瘤细胞的表面直接被释放，因此反映了肿瘤的大小和活性。几项研究证明，不仅淋巴癌细胞，也有一些非淋巴癌细胞，表面都可表达IL-2R。在大多数增殖干扰的造血系统和许多实体瘤中sIL-2Rα升高。

纳米抗体技术，是生物医学科学家在传统抗体的基础上，运用分子生物学技术结合纳米粒子科学的概念进行的抗体工程革命，从而研发出的最新和最小的抗体分子，最初由比利时科学家Hamers，R在骆驼血液中发现。普通的抗体蛋白由两条重链和两条轻链组成，而从骆驼血液中发现的新型抗体只有两条重链，没有轻链，这些“重链抗体”能像正常抗体一样与抗原等靶标紧紧结合，但不像单链抗体那样相互黏连聚集成块。以该“重链抗体”为基础的纳米抗体不仅分子量只是普通抗体的1/10，而且化学性质也更加灵活，稳定性好，可溶性高，表达容易且容易获得，并容易偶联其他分子。因此应用纳米抗体技术研发CD25检测试剂具有广阔的前景。

发明内容

发明目的：本发明所要解决的技术问题是提供一种针对CD25表位的纳米抗体，同时提供该纳米抗体的编码序列及该纳米抗体在制备检测的应用。

技术方案：为实现上述目的，本发明的第一方面，提供了一种CD25的纳米抗体的VHH链，包括框架区FR和互补决定区CDR，所述框架区FR选自下组的FR1～FR4的氨基酸序列：SEQ ID NO：1所示的FR1，SEQ ID NO：2所示的FR2，SEQ ID NO：3所示的FR3，SEQ ID NO：4所示的FR4；所述互补决定区CDR选自下组的CDR1～CDR3的氨基酸序列：SEQ ID NO：5所示的CDR1，SEQ ID NO：6所示的CDR2，SEQ ID NO：7所示的CDR3。

优选地，所述的CD25的纳米抗体的VHH链，它具有SEQ ID NO：8所示的氨基酸序列。

本发明第二方面，一种CD25纳米抗体，它针对CD25表位的纳米抗体，包括两条具有SEQ ID NO：9所示氨基酸序列的VHH链。

本发明第三方面，提供了一种DNA分子，它编码选自下组的蛋白质：本发明所述的CD25的纳米抗体的VHH链，或本发明所述的CD25纳米抗体。

优选地，所述的DNA分子，其特征在于，它具有选自下组的DNA序列如SEQ ID NO：8所示。

本发明的第四方面，提供了一种表达载体，它含SEQ ID NO：8所示的核苷酸序列。

本发明的第五方面，提供了一种宿主细胞，其特征在于，它含有所述的表达载体。

本发明的第六方面，提供了本发明所述的CD25纳米抗体检测CD25分子的用途。