[发明专利]一种微生物腐熟菌剂及其制备方法和应用有效
申请号: | 201310219915.7 | 申请日: | 2013-06-05 |
公开(公告)号: | CN103289930A | 公开(公告)日: | 2013-09-11 |
发明(设计)人: | 乔来艳;单俊伟;宋海妹;翟熙伦;张术聪 | 申请(专利权)人: | 中国海洋大学生物工程开发有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/00;C05F15/00;C05F11/08;C05F17/00;C12R1/01;C12R1/07 |
代理公司: | 青岛联智专利商标事务所有限公司 37101 | 代理人: | 王晓晓 |
地址: | 266071 山东省青岛市崂山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 微生物 腐熟 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种苏云金芽孢杆菌HDSW-2,其特征在于其分类命名为苏云金芽孢杆菌Bacillus thuringiensis,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,其保藏编号为:CGMCC No.7573。
2.一种微生物腐熟菌剂,其特征在于它包括冷解糖芽孢杆菌、嗜热脂肪地芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌,所述三株菌均保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,其保藏编号为:冷解糖芽孢杆菌为CGMCC No.4519、嗜热脂肪地芽孢杆菌为CGMCC No.7572、苏云金芽孢杆菌为CGMCC No.7573。
3.、根据权利要求2所述的一种微生物腐熟菌剂,其特征在于:所述腐熟菌剂中三株菌的含菌量为:冷解糖芽孢杆菌50%-60%、嗜热脂肪地芽孢杆菌20%-30%、余量为苏云金芽孢杆菌,按活菌数百分比计算。
4.根据权利要求2所述的微生物腐熟菌剂的制备方法,其特征在于它包括以下步骤:
(1) 制备一级种子液:将所述三菌株在温度为30℃-40℃下恒温摇床培养得到一级种子液;
(2) 制备二级种子液:将所述一级种子液接种到二级发酵罐中培养得到二级种子液,培养温度与步骤(1)相同;
(3) 发酵生产:将所述二级种子液分别转接入生产发酵罐中,通气量为100-150升/分钟;以发酵液中芽孢含量超过80%为指标,终止发酵;
(4) 菌液复配:将三菌株的发酵液混合复配得到微生物腐熟菌剂。
5.根据权利要求4所述的微生物腐熟菌剂的制备方法,其特征在于:所述步骤(1)摇床转速150-220转/分钟,步骤(2) 二级发酵罐转速为100-150转/分钟,步骤(3)生产发酵罐转速为200-300转/分钟。
6.根据权利要求4所述的微生物腐熟菌剂的制备方法,其特征在于:所述步骤(2)中二级种子的发酵培养基分别为:
冷解糖芽孢杆菌:玉米粉 0.5-5 g/L,葡萄糖 5-10 g/L,豆饼粉 5-25 g/L,蛋白胨 2-10 g/L,碳酸钙 1-5g/L,磷酸氢二钾 0.1-2 g/L,硫酸镁 0.2-2g/L,硫酸锰0.01-1 g/L,pH值6.5-8.5;
嗜热脂肪地芽孢杆菌:淀粉1-5 g/L,葡萄糖2-10 g/L,豆粕5-30 g/L,蛋白胨1-5 g/L,碳酸钙1-10g/L,磷酸氢二钾0.1-2g/L,硫酸镁0.2-2 g/L,硫酸锰0.01-1g/L,pH值6.0-8.0;
苏云金芽孢杆菌:淀粉2-7 g/L,葡萄糖2-10g/L,豆粕5-20 g/L,蛋白胨0.1-1 g/L,碳酸钙1-10 g/L,磷酸氢二钾0.1-0.5g/L,硫酸镁0.1-0.5 g/L,硫酸锰0.01-1g/L,pH值6.0-7.5。
7.根据权利要求4所述的微生物腐熟菌剂的制备方法,其特征在于:所述步骤(3)中发酵培养前10小时转速为200转/分钟,通气量为100升/分钟;10-16小时转速为300转/分钟,通气量为150升/分钟;16小时后至发酵结束,转速为200转/分钟,通气量120升/分钟,三菌株发酵时间为18-24小时。
8.根据权利要求2所述的微生物腐熟菌剂在快速腐熟农牧业废弃物和浒苔中的应用。
9.根据权利要求8所述的微生物腐熟菌剂在快速腐熟农牧业废弃物和浒苔中的应用,其特征在于:夏季时腐熟周期为7-20天,冬季时腐熟周期为15-30天。
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