[发明专利]金黄色葡萄球菌分离的方法

权利要求书

1.金黄色葡萄球菌SA分离的方法，其特征在于包括以下步骤：每称取1.0 mg树状分子，悬浮于4 mL 0.01 mol/L，pH 8.0 PBS磷酸缓冲液中，搅拌滴加25%的戊二醛水溶液 545 μL，使戊二醛的终浓度为3%，在摇床150 r/min的转速下室温反应3.5 h ；滴加金黄色葡萄球菌SA特异性抗体1mL，使其终浓度达到3 mg/mL左右；摇床150 r/min 的转速下室温反应24 h；减压旋干溶剂，去离子水溶解，在PBS和去离子水中透析1 d；透析结束将得到的溶液冷冻干燥得树状分子-抗体复合物；（2）取15 mg 长链生物素，悬浮于4 mL 0.01 mol/L，pH 8.0 PBS磷酸缓冲液中，搅拌滴加25%的戊二醛水溶液545 μL，使戊二醛的终浓度为3%；在摇床150 r/min的转速下室温反应3.5 h ；加入0.53 mg步骤（1）所得树状分子-抗体复合物，在摇床150 r/min的转速下室温反应24 h；减压旋干溶剂，去离子水溶解，在PBS和去离子水中透析1 d；透析结束将得到的溶液冷冻干燥得长链生物素-树状分子-抗体复合物；（3）取1 mL待测样品溶液，加入0.1 mg SA抗体和长链生物素共修饰的树状分子即步骤（2）长链生物素-树状分子-抗体复合物，置于混匀仪上，以30 rpm的转速室温孵育15 min，加入0.1 mg修饰有链霉亲和素的纳米磁珠，置于混匀仪上，以30 rpm的转速在室温孵育15 min；常规磁力架分离3 min；（4）去离子水轻轻清洗后，用PBS缓冲液重悬即得富集有金黄色葡萄球菌的纳米磁珠-链霉亲和素-长链生物素-树状分子-抗体-SA复合物。

2.权利要求1所述的方法，其特征在于所述树状分子为氨基化的聚酰胺-胺型树枝状高分子PAMAM-G4，其分子量为14215 Da。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述修饰了链霉亲和素的纳米磁珠粒径为20-50nm，优选为30 nm。