[发明专利]瘤果黑种草籽中的生物碱组分及其制备方法和用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种瘤果黑种草籽分离获得的生物碱组分和单体及其制备方法和它们的降糖用途。

背景技术

黑种草属（Nigella）植物属于被子植物门，双子叶植物纲，毛茛科（Ranunculaceae）金莲花亚科（Helleboroideae）铁筷子族（Helleboreae DC.）。广泛分布在地中海、中欧、西亚、新疆等地，在印度、埃及和中东地区也有种植。该属约有22种，药用植物主要有三种，分别为：瘤果黑种草（Nigella glandulifera Freyn）；果黑种草（Nigella sativa）；以及原产于欧洲南部，在新疆也有栽培的黑种草（Nigella damascena L.）。本研究选取具新疆特有植物资源的瘤果黑种草（Nigella glandulifera Freyn）草籽做为研究对象。

瘤果黑种草又名腺毛黑种草、斯亚旦（维语）、色拉那博（藏语）、景郎（傣语），是维吾尔族、藏族和傣族的常用药材。已收录于《中华人民共和国药典》、《中国药用植物志》、《维吾尔药志》；功能主治：刺激消化健胃、驱风止痛、补肾健脑、利尿发汗、抗蠕虫、治疗哮喘等。现有成药：十二味石榴散、复方木尼孜其颗粒及用于生发的复方斯亚旦生发油、复方斯亚旦生发酊等

国际上对黑种草籽、瘤果黑种草籽的化学成分及活性研究较多，已经证实其具有抗感染、治疗风湿、镇痛、类雌激素活力、抗溃疡、抗病毒、抗细菌、真菌、降脂降糖等作用。但对瘤果黑种草籽的研究只有国内以及韩国的少数研究报道，本发明对瘤果黑种草提取物分段组分进行了降脂降糖活性的研究表明，其中的一些部位具有较好的促进Apo-AI与SR-BI之间的相互作用，进而促胆固醇逆转运的进行，以降低血脂；同时，利用PTP-1B、α-葡萄糖苷酶和蛋白非酶糖化抑制剂筛选模型对提取过程中的成分进行跟踪，已初步证实了瘤果黑种草籽中具有蛋白酪氨酸磷酸1B、α-葡萄糖苷酶和蛋白非酶糖化抑制成分存在。

迄今已从黑种草属植物中分离到的化合物类型有：黄酮类化合物，皂苷类化合物，生物碱类化合物，甾体化合物，酚类化合物，以及香豆素类化合物，醌类化合物，挥发油和多糖等。郝海峰、刘玉明、倪君君等先后从瘤果黑种草籽中分离得到了17个化合物；信学雷等从瘤果黑种草籽中分离得到了33个化合物，其中包括：7个三萜，6个黄酮，3个生物碱，4个甾体化合物，3个异苯并呋喃酮衍生物，4个酚类化合物，2个三糖，以及多种挥发油、不饱和脂肪和脂肪酸。已报道的从瘤果黑种草籽中分离得到的5个新化合物分别为：黑种草糖，黑种草三糖，黑种草碱，黑种草苷，山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖-(1→6)-O-[β-D-吡喃葡萄糖-(1→2)-O-β-D-吡喃半乳糖-(1→2)]-O-β-D-吡喃葡萄糖。对瘤果黑种草籽的生物碱的研究过程中，研究出了新骨架类型生物碱：2,2,3a,6,6,8,9-七甲基壬烷-3a,4-二羟-2H-吡咯[2,3-g]喹啉-3(6H)-酮，并通过体外证实了该单体和专利申请号201310046399.2和专利申请号201310046468.X中的总生物碱Ⅰ和Ⅱ均具有蛋白酪氨酸酶1B抑制作用。

发明内容

本发明目的在于，提供一种瘤果黑种草籽中的生物碱组分及其制备方法和用途，该生物碱组分中所含的单体为2,2,3a,6,6,8,9-七甲基壬烷-3a,4-二氢-2H-吡咯[2,3-g]喹啉-3(6H)-酮；采用石油醚对瘤果黑种草籽进行脱脂，阴干，经过氨水丙酮混合液碱化，氯仿提取，酸溶碱沉，氯仿萃取得到生物碱组分，再用高速逆流色谱结合柱层析法获得具有骨架式（Ⅱ）的单体（2,2,3a,6,6,8,9-七甲基壬烷-3a,4-二氢-2H-吡咯[2,3-g]喹啉-3(6H)-酮式（Ⅰ），并通过体外证实了它们蛋白酪氨酸磷酸1B抑制剂的作用，在L6和3T3-L1细胞株上对葡萄糖消耗具有促进作用，可用于治疗糖尿病的药物或功能食品的应用，及其作为药物组合物的应用。

本发明所述的一种瘤果黑种草籽中生物碱组分，该生物碱组分中所含单体的结构式为：

其中式（Ⅰ）为生物碱单体，名称为：2,2,3a,6,6,8,9-七甲基壬烷-3a,4-二氢-2H-吡咯[2,3-g]喹啉-3(6H)-酮，式（Ⅱ）为其骨架类型。

所述的瘤果黑种草籽中的生物碱组分的制备方法，按下列步骤进行：

a、将粉碎的瘤果黑种草籽中加入石油醚回流脱脂2小时，过滤，滤渣重复用石油醚脱脂5-15次，回收滤渣并干燥，再将干燥的滤渣中加入氨水:丙酮=1:2倍体积的混合液浸泡过夜，干燥；