[发明专利]籼稻光温敏核不育系双8S成熟胚愈伤组织诱导方法无效
申请号: | 201310216141.2 | 申请日: | 2013-06-03 |
公开(公告)号: | CN103250647A | 公开(公告)日: | 2013-08-21 |
发明(设计)人: | 夏石头;陈锦;肖浪涛;彭克勤 | 申请(专利权)人: | 湖南农业大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王朋飞 |
地址: | 410128 湖*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 籼稻 光温敏核 不育 成熟 胚愈伤 组织 诱导 方法 | ||
1.一种籼稻光温敏核不育系双8S成熟胚愈伤组织诱导方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)第一次诱导培养:获得经灭菌消毒的双8S带胚米粒,接种到N6大量50ml/L+MS微量10ml/L+MSV铁盐10ml/L+VB110mg/L+VB310mg/L+VB610mg/L+2,4-D2.5mg/L+6-BA0.2mg/L+水解酪蛋白400mg/L+脯氨酸500mg/L+肌醇100mg/L+植物凝胶3.2g/L+蔗糖30g/L的诱导培养基上,放入暗室培养10-12天,获得愈伤组织;
2)愈伤组织继代培养:将步骤1)获得的愈伤组织切下,转入新的诱导培养基,放入暗室培养10-12天,获得双8S成熟胚愈伤组织。
2.如权利要求1所述一种籼稻光温敏核不育系双8S成熟胚愈伤组织诱导方法,其特征在于,步骤1)所述灭菌消毒为将带胚的米粒放入体积百分比75%的乙醇溶液浸泡90s,无菌水洗2次,次氯酸钠溶液浸泡30min,无菌水洗5-8次后干燥。
3.如权利要求1所述一种籼稻光温敏核不育系双8S成熟胚愈伤组织诱导方法,其特征在于,步骤1)所述第一次诱导培养,用9cm口径培养皿进行,接种量为32-35粒双8S带胚米粒每个培养皿。
4.如权利要求1所述一种籼稻光温敏核不育系双8S成熟胚愈伤组织诱导方法,其特征在于,步骤2)所述愈伤组织继代培养,用9cm口径培养皿进行,接种量为22-25粒愈伤组织每个培养皿。
5.如权利要求1所述一种籼稻光温敏核不育系双8S成熟胚愈伤组织诱导方法,其特征在于,所述诱导培养基的pH值为5.83。
6.如权利要求1所述一种籼稻光温敏核不育系双8S成熟胚愈伤组织诱导方法,其特征在于,所述暗室培养的培养温度为28℃。
7.权利要求1-6任一项所述的一种籼稻光温敏核不育系双8S成熟胚愈伤组织诱导方法在双8S繁育中的应用。
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