[发明专利]一种适于口服的轮状病毒疫苗

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体地，涉及适于口服施用的轮状病毒疫苗配方。

背景技术

轮状病毒(Rotavirus，RV)是引起婴幼儿严重腹泻和脱水的主要病因，在发展中国家和发达国家都是一个重要的公共卫生问题，全世界<5岁的儿童每年大约有600,000左右的死亡病例，85%的死亡儿童在发展中国家。轮状病毒腹泻不但造成社会的疾病负担，而且带来了巨大的经济损失。即便在发达国家，婴幼儿轮状病毒感染也是非常常见的。美国的研究发现每年用于轮状病毒感染有关的医疗费用高达3.52～10亿美元。实施计划免疫可以节约0.79亿美元用于卫生保健，4.66亿美元用于社会其他方面。我国大陆的调查显示：在经济水平不同的地区，5岁以下轮状病毒腹泻患儿门诊就诊每次所需费用为64～248元，住院治疗每次所需费用则为658～1920元，初步估计全国轮状病毒腹泻的平均门诊治疗费用100元，平均住院费用约为839元。

到目前为止，轮状病毒感染无特效治疗药物，主要依赖连续几天的补液进行治疗。更为严重的是，轮状病毒的感染与卫生条件没有相关性，即使卫生条件得到改善，仍无法有效控制病毒的传播。目前对于RV腹泻尚无特效药治疗，因此应用疫苗预防被认为是最好的预防措施，疫苗免疫是唯一可行的预防轮状病毒腹泻较高发病率和死亡率的方法。有鉴于此，世界卫生组织在1997年将轮状病毒疫苗的开发列为全球新疫苗研制开发的第一项目，世界各国的有关机构都在积极进行轮状病毒疫苗的研制工作。

口服施用是一种重要的疫苗接种方式，相对注射式的免疫方式有其独特的优点。对某些胃肠道病原菌引起的疾病，采用口服的方式接种免疫能够更加快速、直接的刺激胃肠道粘膜免疫系统，从而产生相应的免疫应答使机体具有免疫保护。口服施用的疫苗由于需经受胃部的消化系统，故对其配方成分的稳定性、抗酸性和安全性方面具有特殊的要求。首先，疫苗配方必须保证抗原成分的稳定性，确保疫苗在使用时有最大效力。其次，做为口服疫苗，配方须具有良好的抗胃酸能力，以保证抗原的活性。再次，产品的安全性是基础，而产品的安全性来自配方成分的选择。

目前已报道的针对口服类疫苗的配方成分（参见，例如US3783098、US3915794和EP028563），第一种是SPGA，它主要含有牛或人的血清白蛋白、水解酪蛋白或明胶；第二种为任选的谷氨酸的碱金属盐、糖（葡萄糖、蔗糖或葡聚糖）、以及磷酸单盐或双盐，或它们的混合物。这些组合物具有很大的缺陷。首先它们具有潜在的生物学危险，比如化学组成不确定的动物或人源的蛋白质或蛋白质水解产物。此外，本技术领域现有这些组合物未能使减毒活疫苗具有足够的稳定性和抗酸性，使疫苗的贮存条件和效期受到极大的限制，甚至进一步影响疫苗的有效性和安全性。目前未见有适于口服的、稳定性强的轮状病毒疫苗的报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种安全、有效的适合口服施用的轮状病毒疫苗配方。

本发明的另一目的在于提供一种配制该疫苗的方法。

本发明提供的适于口服的轮状病毒疫苗，含有轮状病毒抗原、糖类、磷酸盐和羧酸盐。

本发明的疫苗，其每1mL含10⁴～10⁸个感染单位的轮状病毒抗原。所述感染单位为CCID₅₀或PFU或FFU或其它可表示具有感染性抗原的单位。

每1mL该疫苗中含有0.1～0.6g的糖类。

每1mL该疫苗中含有0.05～0.5mmol的磷酸根。

每1mL该疫苗中含有0.05～0.5mmol的羧酸盐。

本发明疫苗所述的糖类为蔗糖、乳糖、右旋糖酐、海藻糖、甘露糖、半乳糖、山梨糖醇和/或甘露醇。

优选地，糖类为蔗糖。

本发明疫苗所含的磷酸盐为磷酸二氢钾和磷酸氢二钾的混合物或磷酸二氢钠与磷酸氢二钠的混合物。优选为磷酸氢二钾和磷酸二氢钾的混合物。

上述磷酸盐混合物中磷酸二氢盐和磷酸氢二盐的摩尔浓度比为1:1～10。优选的二者摩尔浓度比为1:2。

所述羧酸盐具有较好的抗胃酸能力，保持抗原成分的稳定和有效性。本发明优选的羧酸盐为琥珀酸盐或柠檬酸盐。

本发明的口服轮状病毒疫苗，其pH值为5-8。

优选地，具备较好抗酸效果和病毒稳定性的口服疫苗配方包括：

●蔗糖溶液的终浓度为30%（w/v）；

●磷酸钾盐摩尔终浓度为0.1M或0.2M，其中磷酸二氢钾和磷酸氢二钾的摩尔浓度比为1:2；