[发明专利]一种菠菜中草酸含量的测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种草酸含量测定方法，具体为一种菠菜中草酸含量的测定方法。

背景技术

草酸是植物体内普遍存在的一种二元羧酸，主要以游离态(草酸钠和草酸钾)和草酸钙结晶的形式存在，从环境毒理学和食品营养学的角度看，草酸是一种环境毒素和抗营养因子，长期食用草酸含量高的蔬菜容易引发关节炎、低血钙、膀胱结石和肾结石等疾病。另一方面，草酸在钝化重金属和增强植物抗逆性等方面起着重要的作用，是植物体内环境胁迫的响应因子，参与钙离子和pH 值调节。利用化学法或仪器分析法可以定量分析测定植物水溶性草酸和总草酸含量，总草酸和水溶性草酸的差值为难溶性草酸。水溶性草酸较易被人体吸收，进入体液循环系统，与人类健康关系较为密切，测定总草酸含量可为研究植物代谢生理提供重要信息。传统的高锰酸钾容量法中总草酸含量的测定使用3ml 6mol/L HCl 浸提，而用离子色谱法测定时，使用高浓度的盐酸浸提，会造成待测液中含有大量的氯离子，过高的氯离子浓度易引起阴离子柱过载，降低柱效。

发明内容

本发明提供一种菠菜中草酸含量的测定方法，本方法具有操作简便、干扰小、灵敏、回收率高等特点，可作为蔬菜不同形态草酸含量测定的分析方法。

本发明创造通过以下技术方案实现：一种菠菜中草酸含量的测定方法，包含有如下步骤：

A：将新鲜的菠菜样品洗净晾干，取200g 剪碎混匀的样品，加入150ml 水，放入组织匀浆机中匀浆，用50ml水冲洗，冲洗液并入匀浆液混匀备用；

B:称取2.0g 匀浆液进行菠菜草酸含量的测定，

总草酸含量的测定是加入一定量的HCl 溶液浸提20min，然后用水定容至100ml；

水溶性草酸的测定是直接加水至50ml 左右，水浴浸提，冷却后定容至100ml；

将上述定容后的溶液在转速为5000-15000r/min ，离心时间为5-20min的条件下离心，澄清，稀释5～20 倍，过滤膜后用色谱仪测定。

所述色谱条件为：IonPac AS11阴离子柱(4mm×250mm)，IonPac AG11

保护柱，抑制电流：50mA；淋洗液：12mmol/L NaOH；

流速：1.0ml/mi n ；进样量：25μl 。

所述转速为10000r/min，离心时间为10min。

所述滤膜的孔为0.45μm。

本发明的有益效果是：

采用IonPac AS11 阴离子柱，电导检测器，以12mmol/L NaOH 为淋洗液，可有效分离和定量分析菠菜中的水溶性草酸和总草酸。菠菜草酸的提取测定主要受难溶性草酸的影响，菠菜中难溶性草酸占总草酸百分比较高，其水溶性草酸随水浴浸提温度的升高而增大，总草酸含量在HCl 加入量低于2.0ml 时随HCl加入量的增加而增大。采用2ml 0.5mol/L HCl 浸提总草酸，用沸水浴20min 浸提水溶性草酸，适用于各种菠菜样品中草酸的提取测定。采用该方法对菠菜各品种进行测定，其加标回收率在95.5%～103.5%之间。本方法具有操作简便、干扰小、灵敏、回收率高等特点，可作为蔬菜不同形态草酸含量测定的分析方法。

具体实施方式

下述结合具体实施方式对本发明做进一步描述。

实施例1：

（1）将新鲜的菠菜样品洗净晾干，取200g 剪碎混匀的样品，加入150ml 水，放入组织匀浆机中匀浆，用50ml水冲洗，冲洗液并入匀浆液混匀备用；

（2）称取2.0g 匀浆液进行菠菜草酸含量的测定，总草酸含量的测定是加入一定量的HCl 溶液浸提20min，然后用水定容至100ml；水溶性草酸的测定是直接加水至50ml 左右，水浴浸提，冷却后定容至100ml；将上述定容后的溶液在转速为5000r/min ，离心时间为20min的条件下离心，澄清，稀释20 倍，过0.45μm滤膜后用色谱仪在色谱条件为：IonPac AS11阴离子柱(4mm×250mm)，IonPac AG11保护柱，抑制电流：50mA；淋洗液：12mmol/L NaOH；流速：1.0ml/mi n ；进样量：25μl ，测定。

实施例2

（1）将新鲜的菠菜样品洗净晾干，取200g 剪碎混匀的样品，加入150ml 水，放入组织匀浆机中匀浆，用50ml水冲洗，冲洗液并入匀浆液混匀备用；