[发明专利]一种制备富硒猴头菌的方法

权利要求书

1.一种制备富硒猴头菌的方法，其特征在于：包括如下步骤：

(1)斜面试管培养：将分离纯化的菌种接种于斜面试管培养基中培养；

(2)三角瓶培养：将斜面试管培养得到的菌种接种到三角瓶培养基中培养；

(3)发酵罐培养：将三角瓶培养得到的菌种接入发酵罐培养基中进行培养；

(4)富硒猴头菌菇的栽培：在20-27℃向盛有培养基的容器中，接种其中培养基总重量的1.0-3.0%的步骤（3）得到的菌种，培养，直到猴头子实体长出；

其中，在步骤（2）～（4）的培养基中均含有亚硒酸钠。

2.根据权利要求1所述的制备富硒猴头菌的方法，其特征在于：所述斜面试管培养基的每1升液体培养基中含有180-220g的土豆、18-22g的葡萄糖、1-2g的磷酸二氢钾、0.7-0.8g的硫酸镁、18-22g的琼脂，并且所述培养基的pH值为4.5-6。

3.根据权利要求2所述的制备富硒猴头菌的方法，其特征在于：所述斜面试管培养基的每1升液体培养基中含有200g土豆、20g葡萄糖、1g磷酸二氢钾、0.5g硫酸镁、20g琼脂，并加水至1L，并且所述培养基的pH值为5.02。

4.根据权利要求2所述的制备富硒猴头菌的方法，其特征在于：所述的三角瓶培养基和发酵罐培养基的每1升液体培养基中均含有45-55g的麦麸、18-22g的葡萄糖、1.8-2.2g的蛋白胨、1.8-2.2g的酵母粉、1.3-1.7g的磷酸二氢钾、0.7-0.8g的硫酸镁、80-120mg的亚硒酸钠，并且所述培养基的pH值为4.5-6。

5.根据权利要求4所述的制备富硒猴头菌的方法，其特征在于：所述三角瓶培养基的每1升液体培养基中含有50g麦麸、20g葡萄糖、2g蛋白胨、2g酵母粉、1.5g磷酸二氢钾、0.75g硫酸镁、109.7mg亚硒酸钠，并用水补足至1L，并且所述培养基的pH值为5.0；

所述三角瓶培养的条件为：24-26℃温度，120-160转/分钟的振动速度下，在恒温振荡培养箱中培养5-7天。

6.根据权利要求5所述的制备富硒猴头菌的方法，其特征在于：所述的振动速度为140转/分钟。

7.根据权利要求6所述的制备富硒猴头菌的方法，其特征在于：步骤（3）中，所述的发酵罐培养包括一级发酵罐培养和二级发酵罐培养。

8.根据权利要求7所述的制备富硒猴头菌的方法，其特征在于：步骤（3）的发酵培养条件为：首先将发酵罐中的液体培养基灭菌，将灭菌后的培养基冷却，再将三角瓶培养后的菌种接入培养基中培养；

所述的灭菌条件为：在50L气升式发酵罐中装入20L液体培养基，培养基温度为250C-270C，pH值为4.5-6，并加入0.045-0.055%培养基重量的食用消泡剂，在14.7×104Pa压力下通入蒸汽加热到115-1250C，保持30-45分钟；

在步骤（3）中，所述的培养条件如下：培养温度为25-260C，通气量为1:0.5V/V·min，压力保持4.903-7.0845×104Pa，培养4-6天。

9.根据权利要求7或8所述的制备富硒猴头菌的方法，其特征在于：所述步骤（4）的培养基中含有750-800g的玉米芯、180-220g的麦麸、8-12g的蔗糖、8-10g的石膏和87.76-109.70mg的亚硒酸钠；

步骤（4）中的培养条件如下，首先将所述的培养基物料混合均匀后，加入适量的水，其重量份为物料：水＝1：2，拌匀装入聚丙烯塑料袋中灭菌，将灭菌后的固体培养基放置于无菌通风室中冷却至240C-250C，向培养基接种其总重量的1.7%的液体菌种；放入培养室中培养；温度保持在250C-280C湿度保持在95%-100%培养80-100天。

10.根据权利要求9所述的制备富硒猴头菌的方法，其特征在于：所述培养基中含有780g的玉米芯、200g的麦麸、10g的蔗糖、10g的石膏和109.7mg的亚硒酸钠；培养天数为90天。